[发明专利]一种破骨细胞的培养方法无效
| 申请号： | 201310501049.0 | 申请日： | 2013-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN104560867A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 秦宏佳 | 申请（专利权）人： | 大连市沙河口区中小微企业服务中心 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 116000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种破骨细胞的培养方法，包括如下步骤：
（1）收集大鼠大腿骨和胫骨中的骨髓细胞，悬浮于细胞培养液中；
（2）细胞悬浮液通过葡聚糖凝胶Sephadex G10色谱柱，用细胞培养液洗涤，收集细胞；
（3）收集得到的细胞种于培养板内，培养板内添加含有细胞因子的培养基共同培养，每隔2天换液，培养4-7天，即可得到破骨细胞；
其中，步骤（3）中所述培养基为含有10-8M1a,25(OH)2D3、20-100ng/ml破骨细胞生成因子、10-50ng/ml巨噬细胞集落刺激因子、15-20%胎牛血清的DMEM。
2.根据权利要求1所述的破骨细胞的培养方法，其特征在于，步骤（1）或（2）所述的细胞培养液为含有15-20%胎牛血清的DMEM。
3.根据权利要求1所述的破骨细胞的培养方法，其特征在于，步骤（3）中种于培养板中的细胞数为1×106-4×106个/cm2。
4.根据权利要求1所述的破骨细胞的培养方法，其特征在于，步骤（1）所述大鼠为4-6周龄。
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