[发明专利]人表皮细胞生长因子核酸序列及大肠杆菌表达载体有效

专利信息
申请号: 201310461899.2 申请日: 2013-09-30
公开(公告)号: CN103484471A 公开(公告)日: 2014-01-01
发明(设计)人: 王悦 申请(专利权)人: 王悦
主分类号: C12N15/12 分类号: C12N15/12;C12N15/70;C07K14/485
代理公司: 厦门南强之路专利事务所(普通合伙) 35200 代理人: 马应森
地址: 361003 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 人表皮细胞生长因子核酸序列及大肠杆菌表达载体,涉及基因工程和多肽类药物。新的人表皮细胞生长因子DNA,具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列。大肠杆菌表达载体pBADME包括SEQ ID No.1所示核苷酸序列的载体。根据人表皮细胞生长因子hEGF全长序列设计引物,并替换掉密码子中的ACA序列以获得不含ACA序列的hEGF基因,再将hEGF-ACA-基因序列克隆进入pBADM载体,重组成表达载体pBADME;将构建好的表达载体pBADME分别转化至大肠杆菌BL-21/JM109,培养至OD600达到3,再培养至OD600达到0.5,用IPTG与阿拉伯糖双诱导,得人表细胞皮生长因子。
搜索关键词: 表皮 细胞 生长因子 核酸 序列 大肠杆菌 表达 载体
【主权项】:
人表皮细胞生长因子DNA(hEGF‑ACA‑),其特征在于具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列,该核苷酸序列共有162个核苷酸,由人工合成获得,其中,最后3个TAA为终止密码子,除外加TAA终止密码子外,分别是第81个碱基与第111个碱基的胞嘧啶(C)突变为胸腺嘧啶(T)。
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