[发明专利]一种莴苣花粉离体萌发培养基及测定花粉活力的方法

摘要

本发明公开了一种莴苣花粉离体萌发培养基及测定花粉活力的方法，以蒸馏水为溶剂，其包含的组分为ME3，PEG4000和蔗糖。步骤：（1）采集花粉：选取当天开放的花序，移入盛有清水的保鲜袋，带回室内；（2）花粉离体液体培养基的制备；（3）花粉的撒布及培养：将载有液体培养基的载玻片水平放置于实验台上，用镊子摘除头状花絮的花瓣，剥开聚药花蕊取出花药，将花药在培养基表面滑动使花粉单层、均匀地散落分布在培养基表面上，花粉管生长；（4）花粉活力的测定：离体培养后，观察、统计花粉萌发率，花粉萌发率反应有生活力花粉所占比例。不仅快速、简单易行，培养效果好，获得大量具有生活力的萌发花粉，有效测定花粉活力，具有较大的实际应用价值。

主权项

一种莴苣花粉离体萌发液体培养基，以蒸馏水为溶剂，其特征在于：其包含的组分为ME3，170－190g·L‑1的PEG4000和90－110g·L‑1的蔗糖，pH为5.8－6.0；所述ME3的组分为：硝酸钾950－1050mg·L‑1、氯化铵261.25－288.75mg·L‑1、四水硝酸钙1520－1680mg·L‑1、磷酸二氢钾80.75－89.25mg·L‑1、氯化钾166.25－183.75mg·L‑1、七水硫酸镁475－525mg·L‑1、碘化钾0.83mg·L‑1、硼酸100mg·L‑1、五水硫酸铜0.025mg·L‑1、二水钼酸钠0.25mg·L‑1、六水氯化钴0.025mg·L‑1、乙二胺四乙酸二钠7.45mg·L‑1、七水硫酸亚铁0.025、盐酸吡哆醇1.0mg·L‑1和盐酸硫胺1.0mg·L‑1；一种莴苣花粉离体萌发液体培养基的制备方法，其步骤如下：A、配置母液：大量元素、微量元素、铁盐，有机物，在制备母液的时候，按比例称取每种成分，使每种成分分别溶解于蒸馏水，然后混合，定容到1L，贮存于玻璃瓶中，置冰箱保存备用，其中配制铁盐母液时将FeSO4·7H2O 和Na2EDTA分别置于450ml蒸馏水中，78‑82℃条件下加热并搅拌溶解，将FeSO4·7H2O 和Na2EDTA溶液混合，加蒸馏水到最终容积1L，贮存于棕色玻璃瓶中，置冰箱保存备用；B、称取180g PEG4000和 100g蔗糖，分别置于1000mL：PEG4000和500 mL：蔗糖玻璃烧杯中，分别加入500ml和250ml蒸馏水使PEG和蔗糖溶解，将溶解后的蔗糖溶液混入PEG4000溶液中，混合均匀，按照大量元素、微量元素、铁盐、有机成分分别为50ml、5ml、5ml、5ml的顺序加入PEG和蔗糖混合液，然后用蒸馏水定容至最终体积1L,混合均匀；C、最后用1mol·L‑1的NaOH或1mol·L‑1的HCl调整pH值至5.8－6.0，获得花粉离体液体培养基。