[发明专利]一种莴苣花粉离体萌发培养基及测定花粉活力的方法

说明书

技术领域

本发明属于蔬菜植物花粉活力测定技术领域，特别涉及一种莴苣花粉离体萌发液体培养基，还涉及利用该液体培养基离体培养莴苣花粉萌发测定花粉活力的方法。 

背景技术

莴苣（Lactuca sativa L.）属于菊科（Compositae）、莴苣属（Lactuca）一、二年生草本植物，原产于地中海沿岸，喜冷凉气候，不耐高温。莴苣中碳水化合物含量较低，无机盐和维生素含量丰富，尤其较多的烟酸，对于高血压、心脏病患者有利尿、降血压等的作用。因此，莴苣被世界各地广泛栽培，已经成为人们喜爱的主要蔬菜。 

近年来，随着消费者对莴苣需求增加，促使对高品质、优经济性状莴苣材料的需求也迅速增加，然而，单靠现存的莴苣资源已不能满足需求，在此情况下，各地普遍开展了莴苣种质资源基础研究。丰富的种质资源是进行莴苣遗传研究和种质改良的物质基础，具有特艺性状莴苣种质的研究鉴定及其保存是科学开展良种培育的前提。鉴于莴苣花粉作为莴苣遗传资源的主要载体，因此，进行莴苣花粉活力测定的研究，对莴苣种质资源保存与创新、优良品种的选育非常重要的理论和实践意义。 

花粉萌发是花粉吸收营养后，体积增大，内部膨压增加，使花粉内壁沿萌发孔处向外突出，形成花粉管的过程。启动花粉萌发是一个较复杂的过程，其萌发的基本条件需要糖源、硼酸及矿质元素的参与。花粉离体萌发与花粉管生长测定花粉活力测定结果较为稳定，能较准确反映花粉活力的实际情况。但花粉离体萌发需要适宜的培养基，常用的培养基基本成分为糖和硼酸。蔗糖是糖的主要来源，浓度一般为10%－20%；硼酸为0.001%－0.005%，pH5.5－6.5。近年来研究表明基本培养基中添加Ca²⁺，Mg²⁺，K⁺，PEG等促进花粉萌发的元素可有效促进较难萌发花粉萌发。赵洪波等人为PEG对菊花花粉离体萌发生长具有显著促进作用。目前，已经成功离体培养出多种植物的花粉，如百合、烟草等离体培养技术已经相当成熟，而对于菊科的莴苣花粉离体培养研究较少。 

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种莴苣花粉的离体萌发培养基，该培养基为液体培养基，配制简单，花粉萌发所需时间短，30分钟后就可以观察到莴苣花粉萌发想象，2小时后可以清晰观察到花粉的萌发，是一种高效培养莴苣花粉萌发的液体培养基。 

本发明的另一个目的是在于提供了一种液体培养基离体培养莴苣花粉萌发测定花粉活力的方法，方法易行，操作简便，在确定莴苣花粉离体萌发培养体系的基础上，对莴苣花粉 离体培养，准确、有效的测定莴苣花粉活力。 

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施： 

一种莴苣花粉离体萌发液体培养基，以蒸馏水为溶剂，其包含的组分为ME₃，170－190g·L^-1的PEG4000和90－110g·L^-1的蔗糖，pH为5.8－6.0。 

Monnior培养基（ME₃培养基），聚乙二醇（PEG），英文名polyethylene glycol。