[发明专利]一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒，包括检测引物、10×PCREasyTaq缓冲液2.0µl、10mM的dNTPs0.5µl、活性酶浓度为5U/ml的Taq聚合酶0.4µl、甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种阳性对照DNA各1µl、重量浓度≥99%的超纯水20µl；还公开了检测方法，包括如下步骤：(1)提取植物组织或土壤DNA；（2）对DNA进行PCR扩增；（3）对扩增产物进行电泳分离，分离后再经溴化乙锭染色于紫外灯下根据扩增产物的大小判定结果，本发明的优点是提供一种准确性高、操作简便、特异性强且灵敏度高的甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种的快速检测与鉴定试剂盒及其方法。

主权项

一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒的试剂包括检测引物、10×PCR Easy Taq缓冲液2.0µl、10mM 的dNTPs0.5µl、活性酶浓度为5U/ml的 Taq聚合酶0.4µl、甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种阳性对照DNA各1µl、重量浓度≥99%的超纯水20ul；检测引物包括浓度为1pmol/µl的枯萎病菌通用引物W106R、W106S各1µl，浓度均为10pmol/µl 的甘蓝枯萎病菌1号生理小种的上游引物1#77R、下游引物1#77S各1µl，浓度均为10pmol/µl 的甘蓝枯萎病菌2号生理小种上游引物2#40R、下游引物2#40S各1µl；1#77R的序列5'‑ AAATCCAAGGTGCGAAGA ‑3'，1#77S的序列为5'‑ CCAGGCTACACTAATACAACAG ‑3'，2#40R的序列为5'‑ CTTTCGCTTCTCCCTTCA ‑3'，2#40S的序列为5'‑ AACGCATCGTCTTCTATT ‑3'。