[发明专利]一种凝胶层析柱的装柱方法及其检测有效
申请号: | 201310404465.9 | 申请日: | 2013-09-06 |
公开(公告)号: | CN103487533A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
发明(设计)人: | 张健;张颖;赵金玉;董兴华;马敏华;李静;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 北京科兴生物制品有限公司 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/02 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供一种凝胶层析柱的装柱方法,包括步骤:1)配制凝胶悬液:在凝胶中加入0.02-0.4mol/L NaOH溶液和含有NaCl的磷酸盐缓冲溶液,制成碱盐混合的凝胶悬液;2)装柱:在柱管底部加入纯化水,然后将凝胶悬液倒入柱管;泵入NaOH溶液与含的磷酸盐缓冲溶液1∶1.0-3混合的碱盐缓冲液,待凝胶悬液液面高度不变时,开始下一平衡步骤;3)平衡:用含NaCl的缓冲液平衡1-3倍柱体积;4)柱效检测:用NaCl作为示踪剂,监测电导值变化,得到柱效结果。使用本发明装柱方法与传统装柱法相比,最终得到的装柱效果是一样的,但用新型装柱法可大大提高装柱效率,克服了反复装柱和平衡体积大的缺陷。 | ||
搜索关键词: | 一种 凝胶 层析 方法 及其 检测 | ||
【主权项】:
一种凝胶层析柱的装柱方法,其特征在于,包括步骤:1)配制凝胶悬液:在凝胶中加入碱盐缓冲液,所述碱盐缓冲液为体积比例为1:1.0‑3.0混合的0.02‑0.4mol/L NaOH溶液和含有0.05‑0.8mol/L NaCl的PBS磷酸盐缓冲溶液,制成凝胶和碱盐缓冲液混合的凝胶悬液;2)装柱:a)在柱管底部加入纯化水,然后将凝胶悬液倒入柱管,纯化水体积为凝胶悬液体积的1‑10%;b)装上层析柱的柱头;c)泵入0.02‑0.4mol/L NaOH溶液与含0.05‑0.8mol/L NaCl的PBS磷酸盐缓冲溶液1:1.0‑3.0混合的碱盐缓冲液,待凝胶悬液液面高度不变时,开始下一平衡步骤;3)平衡:用含0.05‑0.8mol/LNaCl的磷酸盐缓冲液平衡1‑3倍柱体积,平衡流速为30±5cm/h;4)柱效检测:用1‑4mol/LNaCl作为示踪剂,监测电导值变化,得到柱效结果。
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