[发明专利]一种凝胶层析柱的装柱方法及其检测

权利要求书

1.一种凝胶层析柱的装柱方法，其特征在于，包括步骤：

1）配制凝胶悬液：在凝胶中加入碱盐缓冲液，所述碱盐缓冲液为体积比例为1:1.0-3.0混合的0.02-0.4mol/L NaOH溶液和含有0.05-0.8mol/L NaCl的PBS磷酸盐缓冲溶液，制成凝胶和碱盐缓冲液混合的凝胶悬液；

2）装柱：

a)在柱管底部加入纯化水，然后将凝胶悬液倒入柱管，纯化水体积为凝胶悬液体积的1-10%；

b)装上层析柱的柱头；

c)泵入0.02-0.4mol/L NaOH溶液与含0.05-0.8mol/L NaCl的PBS磷酸盐缓冲溶液1:1.0-3.0混合的碱盐缓冲液，待凝胶悬液液面高度不变时，开始下一平衡步骤；

3）平衡：用含0.05-0.8mol/LNaCl的磷酸盐缓冲液平衡1-3倍柱体积，平衡流速为30±5cm/h；

4）柱效检测：用1-4mol/LNaCl作为示踪剂，监测电导值变化，得到柱效结果。

2.根据权利要求1所述的装柱方法，其特征在于，所述步骤1）中，凝胶和碱盐液的比例为1:1.0-3.0。

3.根据权利要求1所述的装柱方法，其特征在于，所述步骤2）中，泵入所述碱盐混合液时恒定压力为1±0.1bar。

4.根据权利要求1所述的装柱方法，其特征在于，所述步骤4）为：用1-4mol/LNaCl作为示踪剂，上样体积为柱体积的1-4%，用含0.05-0.8mol/LNaCl的磷酸盐缓冲液洗脱，上样流速与洗脱流速均为30±5cm/h，洗脱1-3倍柱体积，监测电导值变化，得到柱效结果。

5.根据权利要求1-4任一所述装柱方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.0-7.5。

6.根据权利要求1-4任一所装柱方法，其特征在于，所述NaOH溶液和磷酸盐缓冲溶液体积比例为1:3.0。

7.一种凝胶层析柱柱效的检测方法，其特征在于，用1-4mol/LNaCl作为示踪剂，监测电导值变化，得到柱效结果。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，用1-4mol/LNaCl作为示踪剂，上样体积为柱体积的1-4%，用含0.05-0.8mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液洗脱，上样流速与洗脱流速均为30±5cm/h，洗脱1-3倍柱体积，监测电导值变化，得到柱效结果。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.0-7.5。