[发明专利]一种发酵生产红霉素的方法

摘要

本发明属于生物发酵生产领域，提供了一种发酵生产红霉素(Erythromycin)的方法。该方法以红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）为出发菌，主要包括斜面菌种的制备、摇瓶种子液的制备、种子液培养以及发酵罐工艺控制等四个步骤。本发明在种子罐、发酵罐培养基和发酵过程补料中使用精炼棉籽油代替豆油，降低了发酵成本，在优化发酵工艺的基础上使红霉素的发酵效价和红霉素A含量均有较大提高，适合于工业化大生产。

主权项

1.一种利用红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）发酵生产红霉素的方法，其特征在于，发酵培养过程包括如下步骤：1)斜面菌种的制备：将冻干管的红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）菌种用无菌水稀释后接种装有固体培养基的斜面，在温度32‑34℃，湿度30－50％的条件下，培养9－11d，产孢后加无菌水制成孢子悬浮液；2)摇瓶种子液制备：将孢子悬浮液接种摇瓶种子培养基，在摇床转速为180‑250rpm、温度为32‑34℃、湿度为20－50％的条件下培养40－52小时；其中摇瓶种子培养基成分和含量为：蔗糖20‑50g/L，硫酸铵2‑6g/L，玉米浆10‑20g/L，磷酸二氢钾0.1‑0.2 g/L，硫酸镁0.1‑0.3g/L，碳酸钙5‑8 g/L，精炼棉籽油0.05‑0.075g/50ml，pH为5.5‑6.5；3)种子液的制备：将2)中培养好的摇瓶种子液接种到种子罐中，接种量为种子罐培养基体积的1.0‑2.0%，在温度为32‑34℃、搅拌转速为300－500rpm、通气量为0.8VVM‑1.5VVM、罐压为0.05‑0.06MPa的条件下培养40－60小时，其中种子罐培养基各成分及含量为：淀粉20‑40g/L，糊精20‑40g/L，黄豆饼粉20‑40g/L，硫酸铵2‑5g/L，氯化钠2‑5g/L，碳酸钙5‑8g/L，消泡剂0.2‑0.4g/L，精炼棉籽油5‑8g/L，消后pH为6.5‑7.2；4)发酵培养：将3)中培养好的菌液接到发酵罐中，接种量为发酵罐培养基体积的10－15％，在温度为32‑34℃、搅拌转速为500－700rpm、通气量为0.8VVM‑1.2VVM、罐压为0.05－0.06MPa、pH为6.8‑7.1、补入营养物质糖、精炼棉籽油和正丙醇的条件下，培养180－200小时，其中发酵基础培养基各成分的含量为：淀粉30‑55g/L，黄豆饼粉30‑50g/L，精炼棉籽油5‑8 g/L，硫酸铵2‑5 g/L，氯化钠2‑5 g/L，碳酸钙 5‑8g/L，消泡剂0.2‑0.3 g/L ，消后pH为6.5‑7.2。