[发明专利]用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺

摘要

本发明涉及用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，主要步骤如下：（1）原料血浆处理；（2）冷沉淀溶解、离心；（3）病毒灭活；（4）层析精制；（5）离心分离；（6）沉淀溶解；（7）除菌过滤；（8）分装、冻干：本发明的优点：提取出的产品纯度高达95%以上，杂蛋白含量低，能有效的灭活脂包膜病毒和非脂包膜病毒，确保了制品安全；采用盐酸精氨酸和甘氨酸作为稳定剂，能使产品在冻干中得到充分的保护。通过延长冻干时间（约需4-8天，一般厂家均为3天左右），使产品在冻干过程中温度变化稳定，可得到结构均一的冻干产品；增加了人纤维蛋白原的溶解性；产品复溶后，溶解迅速，无明显可见变性蛋白。

主权项

用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，主要步骤如下：（1）原料血浆处理：将原料血浆在5000～20000rpm的速度下进行连续离心分离，得到冷沉淀；（2）冷沉淀溶解、离心：在每公斤步骤1)所得的冷沉淀中加入3～8L注射用水，所得溶解液加热至20～40℃，搅拌使沉淀完全溶解，将其pH值调节到6.6～7.4，加入氢氧化铝凝胶，然后以5000～20000rmp的速度进行连续离心分离，离心所得上清液用洁净过滤器进行洁净过滤；（3）病毒灭活：添加吐温80和磷酸三丁酯，将所得液体在专用的病毒灭活罐内，以40～l00rmp低速搅拌，在24～26℃条件下保温6～8小时；（4）层析精制：在步骤（3)所得的溶液中加入枸橼酸钠、氯化钠、甘氨酸缓冲液，通过凝胶层析柱进行吸附，经层析柱流出来的液体另行收集，用于人纤维蛋白原的制造；（5）离心分离：在步骤（4）所收集的液体中添加甘氨酸，待甘氨酸充分溶解完全后，将溶液冷却至0～10℃，用离心机对其以5000～20000rmp的速度进行连续离心分离，得到人纤维蛋白原沉淀；（6）沉淀溶解：对步骤（5）所得沉淀加入吐温80进行溶解，得到溶解液；（7）除菌过滤：使用灭菌好的过滤器对步骤（6)所得的液体进行除菌过滤；（8）分装、冻干：对步骤（7)所得的液体进行分装，然后进行冻干，冻干时间为4～8天，冻干前先使冻干机急速冻结至‑40℃以下，注意冻干过程前后和整个过程中，制品的温度不能超过35℃，冻干后制品在真空状态下完全密闭胶塞，在冻干机内部注入无菌空气，使压力达到平衡。