[发明专利]用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺

权利要求书

1.用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，主要步骤如下：

（1）原料血浆处理：将原料血浆在5000～20000rpm的速度下进行连续离心分离，得到冷沉淀；

（2）冷沉淀溶解、离心：在每公斤步骤1)所得的冷沉淀中加入3～8L注射用水，所得溶解液加热至20～40℃，搅拌使沉淀完全溶解，将其pH值调节到6.6～7.4，加入氢氧化铝凝胶，然后以5000～20000rmp的速度进行连续离心分离，离心所得上清液用洁净过滤器进行洁净过滤；

（3）病毒灭活：添加吐温80和磷酸三丁酯，将所得液体在专用的病毒灭活罐内，以40～l00rmp低速搅拌，在24～26℃条件下保温6～8小时；

（4）层析精制：在步骤（3)所得的溶液中加入枸橼酸钠、氯化钠、甘氨酸缓冲液，通过凝胶层析柱进行吸附，经层析柱流出来的液体另行收集，用于人纤维蛋白原的制造；

（5）离心分离：在步骤（4）所收集的液体中添加甘氨酸，待甘氨酸充分溶解完全后，将溶液冷却至0～10℃，用离心机对其以5000～20000rmp的速度进行连续离心分离，得到人纤维蛋白原沉淀；

（6）沉淀溶解：对步骤（5）所得沉淀加入吐温80进行溶解，得到溶解液；

（7）除菌过滤：使用灭菌好的过滤器对步骤（6)所得的液体进行除菌过滤；

（8）分装、冻干：对步骤（7)所得的液体进行分装，然后进行冻干，冻干时间为4～8天，冻干前先使冻干机急速冻结至-40℃以下，注意冻干过程前后和整个过程中，制品的温度不能超过35℃，冻干后制品在真空状态下完全密闭胶塞，在冻干机内部注入无菌空气，使压力达到平衡。

2.如权利要求1所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于步骤（2）中按每公斤冷沉淀加入100～110g氢氧化铝凝胶。

3.如权利要求1或2所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于步骤（4）枸橼酸钠、氯化钠、甘氨酸缓冲液配制比例为7:5:18。

4.如权利要求1或2所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于步骤（5)中在0～4℃的条件下进行离心。

5.如权利要求1或2所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于步骤（6）所述的沉淀溶解的具体步骤是：在每公斤步骤（5）所得沉淀物中加入5～10L注射用水，按每升溶解水加入12～15g枸橼酸钠、20～30g盐酸精氨酸、3～10g氯化钠、10-15g甘氨酸，调节pH6.8～7.4，升温30～40℃。

6.如权利要求5所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于在步骤（6）所得溶解液中加入吐温80，其用量为30～50μg/ml溶解液。

7.如权利要求1或2所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于在步骤（3）使溶液中吐温80的最终浓度为1%，磷酸三丁酯最终浓度为0.3%。

8.如权利要求3所述的用于生产人纤维蛋白原的增溶工艺，其特征在于在步骤（5）使所得混合溶液中甘氨酸的浓度为3mol/L。