[发明专利]一种制备核酸芯片的方法及其在倏逝波检测中的应用

摘要

本发明公开了一种制备核酸芯片的方法及其在倏逝波检测中的应用。本发明提供的制备核酸芯片的方法，依次包括如下步骤（1）将表面具有SiO2膜的基片进行表面羟基活化；（2）将步骤（1）得到的基片浸泡于硅烷化剂溶液，室温静置30‑120min后取出基片，洗涤并干燥，然后130‑200℃烘烤1‑12小时；（3）通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面，得到核酸芯片。在倏逝波激发下，可实时监测核酸芯片表面固定的核酸与互补核酸的杂交情况，同时该核酸芯片还可洗脱再生，实现重复使用（可重复使用50次以上）。

主权项

一种用于倏逝波检测的核酸芯片的制备方法，依次包括如下步骤：(1)将表面具有SiO2膜的基片进行表面羟基活化；所述“进行表面羟基活化”的方法如下：将表面具有SiO2膜的基片浸泡于硫酸‑过氧化氢溶液，70‑110℃静置45‑90分钟后取出基片，洗涤并干燥，然后100‑120℃静置3‑12h；(2)将步骤(1)得到的基片浸泡于硅烷化剂溶液，室温静置30‑120min后取出基片，洗涤并干燥，然后130‑200℃烘烤1‑12小时；所述硅烷化剂具有一个可与偶联剂反应的活性基团和3个硅氧基，为APTES或MTS；所述硅烷化剂溶液由硅烷化剂和有机溶剂组成；所述硅烷化剂与所述有机溶剂的体积配比为(0.4‑5)：100；所述有机溶剂为甲苯或二甲苯；(3)通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面，得到核酸芯片；所述步骤(3)中，所述偶联剂为如下(a)或(b)或(c)或(d)：(a)戊二醛；(b)GBMS；(c)EDC和NHS；(d)PIDTC；所述“通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面”的方法如下：将步骤(2)得到的基片浸泡于偶联剂溶液，室温静置30‑120min，后取出基片，洗涤并干燥，然后在表面滴加核酸分子溶液，室温静置，洗涤后用蛋白进行封闭；所述步骤(3)中，所述偶联剂溶液中，每种偶联剂的体积百分浓度为0.4‑5％。