[发明专利]一种制备核酸芯片的方法及其在倏逝波检测中的应用

权利要求书

1.一种用于倏逝波检测的核酸芯片的制备方法，依次包括如下步骤：

(1)将表面具有SiO₂膜的基片进行表面羟基活化；所述“进行表面羟基活化”的方法如下：将表面具有SiO₂膜的基片浸泡于硫酸-过氧化氢溶液，70-110℃静置45-90分钟后取出基片，洗涤并干燥，然后100-120℃静置3-12h；

(2)将步骤(1)得到的基片浸泡于硅烷化剂溶液，室温静置30-120min后取出基片，洗涤并干燥，然后130-200℃烘烤1-12小时；所述硅烷化剂具有一个可与偶联剂反应的活性基团和3个硅氧基，为APTES或MTS；

所述硅烷化剂溶液由硅烷化剂和有机溶剂组成；所述硅烷化剂与所述有机溶剂的体积配比为(0.4-5)：100；所述有机溶剂为甲苯或二甲苯；

(3)通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面，得到核酸芯片；所述步骤(3)中，所述偶联剂为如下(a)或(b)或(c)或(d)：(a)戊二醛；(b)GBMS；(c)EDC和NHS；(d)PIDTC；

所述“通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面”的方法如下：将步骤(2)得到的基片浸泡于偶联剂溶液，室温静置30-120min，后取出基片，洗涤并干燥，然后在表面滴加核酸分子溶液，室温静置，洗涤后用蛋白进行封闭；

所述步骤(3)中，所述偶联剂溶液中，每种偶联剂的体积百分浓度为0.4-5％。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述基片为硅片、石英片、玻璃片或光纤。

3.权利要求1或2所述方法制备得到的核酸芯片。