[发明专利]缺失核定位信号的PML蛋白的定位方法

摘要

本发明涉及生物领域，特别涉及蛋白的检测技术，具体为缺失核定位信号的PML蛋白的定位方法，所述定位方法中通过1）制备靶细胞的切片；2）荧光染色；3）运用激光共聚焦显微镜和/或荧光显微镜对靶细胞中的缺失核定位信号的PML蛋白的荧光强度读取并进一步分析，实现对缺失核定位信号的PML蛋白进行定位甚至定量；本发明首次提供了缺失核定位信号的PML蛋白的检测方法，该方法不仅可以对其定性、定量，还可以实现立体定位；同阴性对照及正常对照相比，本方法的区分度佳，具有很高的特异性和敏感性；本方法对白血病的早期诊断具有辅助诊断作用，为后期研究缺失核定位信号的PML蛋白奠定了基础。

主权项

缺失核定位信号的PML蛋白的定位方法，所述定位方法为激光共聚焦显微镜法，其特征在于:具体包括以下步骤A制备切片取靶细胞涂片，并用甲醛进行固定，再对靶细胞进行透膜处理，得切片；B荧光染色对步骤A所得切片封闭处理后，用PML蛋白的特异性抗体与切片上的所述靶细胞共孵育，形成复合物，用荧光二抗与所述复合物孵育至充分结合，得荧光染色切片；C荧光强度的获取和分析在激光共聚焦显微镜的红绿双色荧光通道中，扫描观察用靶细胞制备的切片，每张所述切片选取荧光表达最强的视野观察，视野数具有统计数意义，并由计算机扫描软件分析结果。