[发明专利]一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法

摘要

将牛肝菌洗净、烘干，称干重；再将牛肝菌切成碎末，放进研钵中，倒入少量液氮，迅速研磨；将得到的牛肝菌研磨样品配成料液比是1:10-1:30的溶液，再倒入60%-90%的乙醇溶液，摇匀后萃取3h-6h，制得萃取液后离心，得到上清液，选择截留分子量10万的超滤膜上清液进行超滤，取过滤液，再对过滤液进行超声提取，所得的过滤液定容于250ml容量瓶，并放置于不同温度的水槽中提取一定时间，取1mlβ-葡聚糖稀释液，加入6%苯酚溶液1ml，浓硫酸2ml，摇匀，冷却，于490nm波长中测吸光度A。

主权项

一种超声技术提取牛肝菌中β‑葡聚糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：将牛肝菌洗净、烘干，称干重；步骤二：将步骤一处理好的牛肝菌切成碎末，放进研钵中，倒入少量液氮，迅速研磨；步骤三：将步骤二得到的牛肝菌研磨样品配成料液比是1:10—1:30的溶液；步骤四：在步骤三中得到的稀释液中倒入60%—90%的乙醇溶液，摇匀后萃取3h—6h，制得萃取液；步骤五：将步骤四得到的萃取液进行离心，得到上清液，离心的条件是2000r/min‑3500 r/min、10min‑25min；步骤六：选择截留分子量10万的超滤膜对步骤四中得到的上清液进行超滤，取过滤液；步骤七：将步骤七得到的过滤液进行的超声提取，超声波的条件是：超声频率40W—120W：时间10min‑20min；步骤八：将步骤七所得的过滤液定容于250ml容量瓶，将β‑葡聚糖稀释液放置于不同温度的水槽中提取一定时间，水槽温度是40℃—100℃，提取时间：2h—5h；步骤九：分别精密吸取上述葡萄糖对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、mL至6个25 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀；分别精密吸取1.0 mL于试管中，于冰水浴条件下缓慢加入6%苯酚溶液1.0 mL，摇匀，迅速加入浓硫酸溶液2.0 mL，摇匀，冷却，同时以苯酚‑浓硫酸溶液作为空白对照，在 490 nm处测量其吸光度值，以葡萄糖的质量浓度(ρ)为横坐标,溶液的吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，经回归分析，得标准曲线方程：A=13.154ρ+0.0158，r=0.998 1，葡萄糖的质量浓度在0.01～0.15 mg·mL‑1范围内与吸光度线性关系良好；步骤十：取1mlβ‑葡聚糖稀释液，加入6%苯酚溶液1ml，浓硫酸2ml，摇匀，冷却，于490nm波长中测吸光度A。