[发明专利]一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法

权利要求书

1.一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：将牛肝菌洗净、烘干，称干重；

步骤二：将步骤一处理好的牛肝菌切成碎末，放进研钵中，倒入少量液氮，迅速研磨；

步骤三：将步骤二得到的牛肝菌研磨样品配成料液比是1:10—1:30的溶液；

步骤四：在步骤三中得到的稀释液中倒入60%—90%的乙醇溶液，摇匀后萃取3h—6h，制得萃取液；

步骤五：将步骤四得到的萃取液进行离心，得到上清液，离心的条件是2000r/min-3500 r/min、10min-25min；

步骤六：选择截留分子量10万的超滤膜对步骤四中得到的上清液进行超滤，取过滤液；

步骤七：将步骤七得到的过滤液进行的超声提取，超声波的条件是：超声频率40W—120W：时间10min-20min；

步骤八：将步骤七所得的过滤液定容于250ml容量瓶，将β-葡聚糖稀释液放置于不同温度的水槽中提取一定时间，水槽温度是40℃—100℃，提取时间：2h—5h；

步骤九：分别精密吸取上述葡萄糖对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、mL至6个25 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀；

分别精密吸取1.0 mL于试管中，于冰水浴条件下缓慢加入6%苯酚溶液1.0 mL，摇匀，迅速加入浓硫酸溶液2.0 mL，摇匀，冷却，同时以苯酚-浓硫酸溶液作为空白对照，在 490 nm处测量其吸光度值，以葡萄糖的质量浓度(ρ)为横坐标,溶液的吸光度(A)为纵坐标，绘制标准曲线，经回归分析，得标准曲线方程：A=13.154ρ+0.0158，r=0.998 1，葡萄糖的质量浓度在0.01～0.15 mg·mL-1范围内与吸光度线性关系良好；

步骤十：取1mlβ-葡聚糖稀释液，加入6%苯酚溶液1ml，浓硫酸2ml，摇匀，冷却，于490nm波长中测吸光度A。

2. 根据权利要求1所述的一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤三所述的溶液料液比取1:15。

3.根据权利要求1所述的一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤四所述的乙醇溶液浓度取70%，萃取时间取4h。

4.根据权利要求1所述的一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，

其特征在于：步骤五所述的离心条件是3000r/min,15min。

5.根据权利要求1所述的一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，

其特征在于：步骤七所述的超声条件是80W, 15min。

6.根据权利要求1所述的一种超声技术提取牛肝菌中β-葡聚糖的方法，

其特征在于：步骤八所述的水槽温度是60℃，提取时间为3h。