[发明专利]4H‑[1]‑苯并吡喃[4,3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼及其衍生物在糖蛋白特异性荧光检测中的应用

摘要

本发明涉及糖蛋白特异性荧光检测技术，具体地说是4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼及其衍生物在糖蛋白特异性荧光检测中的应用。本发明还提供了应用4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼进行糖蛋白特异性荧光检测的方法，包括步骤将电泳后含蛋白质样品的凝胶在固定液中固定；高碘酸溶液氧化；乙酸水溶液冲洗；染色；洗脱。本发明具有灵敏度高、选择性好、操作简单迅速、重现性好、线性关系好、质谱兼容性好、使用安全、成本低廉等优点，可较好地适用于高通量蛋白质组学的研究。

主权项

一种凝胶上糖蛋白特异性荧光检测方法，其包括步骤：1)将经SDS‑PAGE电泳后含蛋白质样品的凝胶置于固定液中固定10～60min，弃固定液；2)在高碘酸溶液里氧化10～40min，其中高碘酸溶液为含重量体积比0.1～1％的高碘酸及按体积比0.5～5％的乙酸水溶液，然后用按体积比0.5～5％的乙酸水溶液冲洗2～5次，每次1～10min；3)加入染色液1～40min，其中染色液为含重量体积比0.0001～0.001％的4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼或其衍生物及按体积比0.5～5％的乙酸水溶液，其中所述衍生物为4H‑[1]‑苯并吡喃[4，3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼的钠盐、钾盐或铵盐；4)加入洗脱液，洗脱液为体积比0.5～5％的乙酸、10～70％乙醇及0.5～2％乙醇胺的水溶液，洗脱1～3次，每次1～10min；5)检测。