[发明专利]4H‑[1]‑苯并吡喃[4,3‑b]噻吩‑2‑甲酸酰肼及其衍生物在糖蛋白特异性荧光检测中的应用

权利要求书

1.一种凝胶上糖蛋白特异性荧光检测方法，其包括步骤：

1)将经SDS-PAGE电泳后含蛋白质样品的凝胶置于固定液中固定10～60min，弃固定液；

2)在高碘酸溶液里氧化10～40min，其中高碘酸溶液为含重量体积比0.1～1％的高碘酸及按体积比0.5～5％的乙酸水溶液，然后用按体积比0.5～5％的乙酸水溶液冲洗2～5次，每次1～10min；

3)加入染色液1～40min，其中染色液为含重量体积比0.0001～0.001％的4H-[1]-苯并吡喃[4，3-b]噻吩-2-甲酸酰肼或其衍生物及按体积比0.5～5％的乙酸水溶液，其中所述衍生物为4H-[1]-苯并吡喃[4，3-b]噻吩-2-甲酸酰肼的钠盐、钾盐或铵盐；

4)加入洗脱液，洗脱液为体积比0.5～5％的乙酸、10～70％乙醇及0.5～2％乙醇胺的水溶液，洗脱1～3次，每次1～10min；

5)检测。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中凝胶固定时间为30min，固定液为按体积比40％乙醇和10％乙酸的溶液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中凝胶在高碘酸溶液里氧化时间为20min，其中高碘酸溶液为含重量体积比0.5％的高碘酸及按体积比1％的乙酸水溶液，然后用按体积比1％的乙酸水溶液冲洗3次，每次5min。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)染色液组成为按重量体积比为0.0002％4H-[1]-苯并吡喃[4，3-b]噻吩-2-甲酸酰肼或其衍生物及按体积比1％的乙酸水溶液。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)洗脱液组成为按体积比1％乙酸、40％乙醇及1％乙醇胺的水溶液。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)染色时间为15min。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)洗脱时间为20min。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤5)是在激光扫描仪下观察染色后的糖蛋白。