[发明专利]一种使BCL11B蛋白降解的方法有效
| 申请号： | 201310199598.7 | 申请日： | 2013-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN103409466A | 公开（公告）日： | 2013-11-27 |
| 发明（设计）人： | 李鹏;李田忠;蒋治武;昊东海 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/68;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人： | 蔡仲德 |
| 地址： | 510530 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种使BCL11B蛋白降解的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群；(2)加入多西环素促使Jurkat细胞表达KLF4；(3)获得表达出KLF4基因的Jurkat细胞蛋白和RNA；(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化；(5)对于(3)步获得的RNA，反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况，确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。本发明方法的优点是：发现了BCL11B特异性蛋白一条新的降解途径，一方面可以部分解释T-ALL细胞凋亡的原因，对白血病治疗有理论指导；另一方面为我们实现人T细胞转分化提供了新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 bcl11b 蛋白 降解 方法 | ||
【主权项】：
一种使BCL11B蛋白降解的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)利用慢病毒感染Jurkat细胞，得到可诱导表达KLF4基因的Jurkat细胞群；(2)向经步骤(1)的得到的Jurkat细胞的RPMI‑1640培养基中加入多西环素，Jurkat细胞群的细胞密度为1×106个/ml，多西环素在细胞培养基中的质量浓度为1.5ug/ml，加入的多西环素促使Jurkat细胞开始表达KLF4；(3)获得表达KLF4的Jurkat细胞蛋白和RNA：在加入多西环素后的10h、20h、30h收集(2)中表达KLF4的Jurkat细胞，再将其裂解获得蛋白质和RNA；(4)对(3)步获得的蛋白质通过Western Blot检测表达KLF4基因的Jurkat细胞中BCL11B蛋白的SUMO化情况；(5)对于(3)步获得的RNA，反转录合成cDNA后采用实时定量PCR检测BCL11B基因表达情况，确定BCL11B的特异性蛋白已被降解。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院广州生物医药与健康研究院，未经中国科学院广州生物医药与健康研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310199598.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
