[发明专利]高效液相色谱法测定大黄鱼中碱性黄1含量的方法

摘要

本发明是一种高效液相色谱法测定大黄鱼碱性黄1含量的方法，精确称取干燥至恒重的碱性黄1标准品各50mg，置于容量瓶中，用超纯水溶解并定容至500mL，临用前将前述溶液用蒸馏水稀释成碱性黄1标准溶液；用高效液相色谱测定碱性黄1标准溶液的峰面积，绘制标准曲线，得到线性回归方程；将大黄鱼实体洗净，超声提取；微孔滤膜过滤后直接注入进样瓶；取20μL大黄鱼供试溶液进行高效液相色谱分析；根据线性回归方程，计算得到大黄鱼中碱性黄1的含量。本发明方法具有提取及分析过程简便快速、回收率高、稳定性好、重复性好的特点，可快速、准确测定大黄鱼中碱性黄1含量，有效测定和控制大黄鱼的产品质量。

主权项

一种高效液相色谱法测定大黄鱼中碱性黄1含量的方法，其特征在于，其步骤如下：（1）碱性黄1标准溶液制备：精确称取干燥至恒重的碱性黄1标准品各50mg，置于容量瓶中，用蒸馏水溶解并定容至500mL，浓度为100μg/mL；临用前采用逐级稀释法将前述溶液配制成一系列浓度在1.0～50.0μg/mL范围内碱性黄1标准溶液；用高效液相色谱测定色素标准溶液的峰面积，绘制标准曲线，得到线性回归方程；（2）大黄鱼供试溶液制备：将大黄鱼实体洗净，加入蒸馏水进行超声提取一次，提取时间为10‑30分钟，提取温度为30℃；提取结束后经0.45μm微孔滤膜过滤后直接注入进样瓶，即得大黄鱼供试溶液； （3）测定：取20μL大黄鱼供试溶液进行高效液相色谱分析；高效液相色谱条件为：色谱柱：内径4.6mm × 柱长150mm×粒径5μm的 RX‑C18；流动相：A 为体积浓度为0.05% 的甲酸溶液，B 为甲醇；梯度洗脱，洗脱条件为：0～4min 内流动相A由70%均匀变化到50%，4～6min 内流动相A 50% 保持2min，6～10min 内流动相A由50%均匀变化到70%；流速：1.0mL/min；进样量：20μL；柱温：30℃；检测波长：410 nm；（4）根据步骤（1）的线性回归方程，计算得到大黄鱼中碱性黄1的含量。