[发明专利]一种检测尿液中PCA3基因和PSA基因表达量的荧光定量PCR法及其诊断试剂盒在审
| 申请号： | 201310182694.0 | 申请日： | 2013-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN104164474A | 公开（公告）日： | 2014-11-26 |
| 发明（设计）人： | 刘代新;何胜祥 | 申请（专利权）人： | 刘代新 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215101 江苏省苏州市吴中区木*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及了一种用于检测尿液样本中PCA3基因和PSA基因表达量的荧光定量PGR法及其诊断试剂盒。该方法指首先跨内含子设计PCA3和PSA的特异性的引物和Taqman荧光探针，2个探针使用不同的荧光染料进行标记，可以在同一反应液中进行扩增和检测，然后利用含PCA3和PSA特异性扩增片段的体外转录RNA定量标准品制作标准曲线，对尿液样本中PCA3和PSA mRNA分别进行定量，最后通过对比PCA3基因和PSA基因表达量，建立PCA3评分标准，PCA3分数可以协助临床医生判断患者得前列腺癌的可能性，有效预测前列腺穿刺阳性活检率。该诊断试剂盒包括：PCA3/PSA-PCR反应液、PCA3/PSA RNA阳性对照、阴性对照、4种已知浓度的PCA3/PSA RNA定量标准品。本发明为临床利用尿液样本进行前列腺癌早期筛查提供了一种新的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 尿液 pca3 基因 psa 表达 荧光 定量 pcr 及其 诊断 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种用于检测尿液样本中PCA3基因和PSA基因表达量的荧光定量PCR法，其特征在于：为避免PCA3和PSA基因组DNA的干扰，首先跨内含子设计PCA3和PSA的特异性的引物和Taqman荧光探针，2个探针使用不同的荧光染料进行标记，可以在同一反应液中进行扩增和检测，同时加入内参检测引物和探针对样本处理和PCR扩增进行全程监控。然后利用含PCA3和PSA特异性扩增片段的体外转录RNA定量标准品制作标准曲线，对尿液样本中PCA3和PSA mRNA分别进行定量。最后通过对比PCA3基因和PSA基因表达量，建立PCA3评分标准，PCA3分数可以协助临床医生判断患者得前列腺癌的可能性，有效预测前列腺穿刺阳性活检率。
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