[发明专利]一种多靶点基因检测甲型H1N1流感病毒变异株的方法和试剂盒

摘要

本发明提供了一种可靠的多基因靶点检测甲型H1N1流感病毒变异株的方法和试剂盒。本发明设计了多组引物针对多个基因靶点，通过毛细管电泳荧光探测显示PCR序列片段大小，来直观地确定扩增的每个片段的准确性。多基因靶点层层确认阳性结果，确保了检测结果的特异性。另外。本试剂盒可以检测出非H1N1甲型流感感染和非甲型流感感染样品，为进一步诊断提供相关信息。

主权项

一种用于检测甲型H1N1流感病毒变异株的试剂盒，该试剂盒含有如下的多组引物：一组针对M基因检测所有甲型流感病毒的引物，其序列如下所示：1)5’‑GAA TGG CTA AAG ACA AGA CC‑3′(SEQ ID NO：1)2)5’‑GCT GCA GTC CTC GCT CAC T‑3’(SEQ ID NO：2)其中序列1)和2)分别为检测所有甲型流感病毒M基因的正义引物和反义引物,反义引物的5’端标记报告荧光基团FAM(6‑carboxy‑荧光素)；一组针对HA基因检测所有H1N1的流感的引物，其序列如下所示：3)5’‑GCA GAT CAA AAG AGC ACA CAA AAT‑3′(SEQ ID NO：3)4)5’‑CCA AAG TTC TTT CAT TTT CCA AT‑3’(SEQ ID NO：4)其中序列3)和4)分别为检测所有H1N1流感病毒HA基因的正义引物和反义引物,反义引物的5’端标记报告荧光基团FAM(6‑carboxy‑荧光素)；一组针对HA基因检测甲型H1N1流感病毒2009变异株的引物序列，其序列如下所示：5)5’‑CAT TCG CAA TGG AAA GAA A‑3′(SEQ ID NO：5)6)5’‑TCC TCA ATC CTG TGG CCA G‑3’(SEQ ID NO：6)其中序列5)和6)分别为检测甲型H1N1流感病毒(2009变异株)HA基因的正义引物和反义引物，反义引物的5’端标记报告荧光基团FAM(6‑carboxy‑荧光素)；一组针对人类beta‑2‑microglobulin基因检测样品中人体组织的引物序列，其序列如下所示：7)5’‑CCA GCA GAG AAT GGA AAG T‑3′(SEQ ID NO：7)8)5’‑GAT GCT GCT TAC ATG TCT CG‑3’(SEQ ID NO：8)其中序列7)和8)分别为检测人类beta‑2‑microglobulin基因的正义引物和反义引物，反义引物的5’端标记报告荧光基团FAM(6‑carboxy‑荧光素)。