[发明专利]一种提取胡萝卜花粉小孢子的方法有效
| 申请号： | 201310133308.9 | 申请日： | 2013-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN103194422A | 公开（公告）日： | 2013-07-10 |
| 发明（设计）人： | 欧承刚;庄飞云 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提取胡萝卜花粉小孢子的方法。该方法包括如下步骤：1）将经过消毒的胡萝卜花序置于直径为70～90mm的研钵中，加入B5液体培养基，用锤头直径为25～30mm的研锤挤压花蕾释放小孢子，得到悬浮液；2）用400目孔径的滤网过滤步骤1）所得悬浮液，收集滤液；3）对步骤2）所得滤液依次按照如下a）-c）的步骤进行梯度离心，获得小孢子：a）150～155g离心4～6min，弃上清，收集沉淀；b）用所述B5液体培养基悬浮步骤a）所得沉淀，125～130g离心4～6min，弃上清，收集沉淀；c）用所述B5液体培养基悬浮步骤b）所得沉淀，105～110g离心4～6min，弃上清，收集沉淀。本发明方法可增加小孢子提取数量，提高培养效率，操作简便，同时还能最大程度减少组织碎片等杂质对小孢子离体培养的影响。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 胡萝卜 花粉 孢子 方法 | ||
【主权项】：
一种提取胡萝卜花粉小孢子的方法，包括如下步骤：（1）将经过消毒的胡萝卜花序置于直径为70～90mm的研钵中，加入B5液体培养基，用锤头直径为25～30mm的研锤挤压花蕾释放小孢子，得到悬浮液；（2）用400目孔径的滤网过滤步骤（1）所得的悬浮液，收集滤液；（3）对步骤（2）所得的滤液依次按照如下（a）‑（c）的步骤进行梯度离心，获得小孢子：（a）150～155g离心4～6min，弃上清，收集沉淀；（b）用所述B5液体培养基悬浮步骤（a）所得沉淀，125～130g离心4～6min，弃上清，收集沉淀；（c）用所述B5液体培养基悬浮步骤（b）所得沉淀，105～110g离心4～6min，弃上清，收集沉淀。
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