[发明专利]一种性能改进的重组金黄色葡萄球菌蛋白A亲和配基及其构建方法有效
| 申请号： | 201310097553.9 | 申请日： | 2013-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN103214563A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 夏海锋;吴璞强;梁振东;王沙莉;郑梦杰 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K14/31 | 分类号： | C07K14/31;C12N15/31;C12N15/70;C12N15/10;C12R1/445 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种性能改进的重组金黄色葡萄球菌蛋白A亲和配基及其构建方法。本发明利用分子生物学方法，选取天然蛋白A的B序列进行分子改造，在B序列的C端添加2个半胱氨酸，从而可以将蛋白A通过双位点偶联的层析基质，使连接更加稳定，在B序列第二个Loop后面添加了6个甘氨酸增加其长度，降低与抗体之间的结合力，从而使洗脱条件更加温和。在此基础上对蛋白A耐高浓度碱的性能进行改造，将B序列第23、30位的天冬酰胺和苯丙氨酸分别替换成苏氨酸和丙氨酸，得到耐碱性能更高的Z序列。然后，利用同尾酶将不同数量的Z序列首尾串联，并利用大肠杆菌的高效表达系统进行过量表达。将表达的重组蛋白A偶联到琼脂糖基质制备亲和层析填料，并用于纯化抗体，结果表明本发明制备的重组蛋白A亲和配基具有较好的洗脱性能和耐碱性能。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 性能 改进 重组 金黄色 葡萄球菌 蛋白 亲和 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种性能改进的重组金黄色葡萄球菌蛋白A，其特征在于重组蛋白A分子结构由1到10个Z片段串联组成。
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