[发明专利]一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法

摘要

本发明提供一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，即采用超高效液相色谱法在同一色谱条件下对草莓果实中的4种分别为叶黄素、β-胡萝卜素、β-隐黄质以及番茄红素的类胡萝卜素成分同时进行含量测定，本发明以丙酮：石油醚=1：2作为提取剂，皂化提取草莓果实中类胡萝卜素，以乙腈：甲醇=9：1为流动相，检测吸收波长为450nm，检测可以在5min内完成。本方法精密度高、灵敏度强、重复性好、回收率高，对草莓中4种类胡萝卜素成分同时进行分离和含量测定，方法简单快速，结果准确可靠，试剂用量少是适合草莓果实类胡萝卜素定性和定量分析的最佳方法。

主权项

一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，其特征在于：采用超高效液相色谱法在同一色谱条件下对草莓果实中的4种分别为叶黄素、β‑胡萝卜素、β‑隐黄质以及番茄红素的类胡萝卜素成分同时进行含量测定；该方法包括如下步骤：（1）制备对照品溶液:分别称取叶黄素、β‑胡萝卜素、β‑隐黄质、番茄红素对照品，加丙酮得到四种单个对照品溶液；再分别精密量取四种单个对照品溶液，置同一容量瓶中，得到混合对照品溶液；（2）制备供试品溶液:精密称定草莓果肉，用液氮快速研磨至粉末状，置具塞锥形瓶中，精密加入丙酮：石油醚=1：2提取剂，于50℃下，避光浸提3小时，过滤出上清液；残渣反复浸提至残渣发白，合并上清液，用旋转蒸发仪40℃蒸至糊状；加入石油醚和10%KOH‑甲醇，避光，室温萃取，皂化过夜；然后过滤，将滤液转入250ml分液漏斗中，并将分液漏斗下层的皂化液转入锥形瓶，用石油醚反复萃取皂化液至石油醚层为无色，接着合并石油醚层至另一250ml分液漏斗中，用双蒸水反复洗涤石油醚层，去残余的丙酮至双蒸水层为中性，继续加入无水硫酸钠脱水后旋转蒸发仪40℃蒸干，最后用丙酮定容，即得；（3）制定色谱条件:仪器：WATERS ACQUITY UPLC H‑Class超高效液相色谱；色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18规格为2.1mm×50mm,1.7u m的色谱柱；流动相：乙腈与甲醇；流动相流速：0.5ml/min；检测波长：450nm；进样体积：5ul；柱温：27℃；（4）进行常规系统适应性试验，注入超高效液相色谱仪进行叶黄素、 β‑胡萝卜素、β‑隐黄质以及番茄红素含量测定。