[发明专利]一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法

权利要求书

1.一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，其特征在于：采用超高效液相色谱法在同一色谱条件下对草莓果实中的4种分别为叶黄素、β-胡萝卜素、β-隐黄质以及番茄红素的类胡萝卜素成分同时进行含量测定；该方法包括如下步骤：

（1）制备对照品溶液:分别称取叶黄素、β-胡萝卜素、β-隐黄质、番茄红素对照品，加丙酮得到四种单个对照品溶液；再分别精密量取四种单个对照品溶液，置同一容量瓶中，得到混合对照品溶液；

（2）制备供试品溶液:精密称定草莓果肉，用液氮快速研磨至粉末状，置具塞锥形瓶中，精密加入丙酮：石油醚=1：2提取剂，于50℃下，避光浸提3小时，过滤出上清液；残渣反复浸提至残渣发白，合并上清液，用旋转蒸发仪40℃蒸至糊状；加入石油醚和10%KOH-甲醇，避光，室温萃取，皂化过夜；然后过滤，将滤液转入250ml分液漏斗中，并将分液漏斗下层的皂化液转入锥形瓶，用石油醚反复萃取皂化液至石油醚层为无色，接着合并石油醚层至另一250ml分液漏斗中，用双蒸水反复洗涤石油醚层，去残余的丙酮至双蒸水层为中性，继续加入无水硫酸钠脱水后旋转蒸发仪40℃蒸干，最后用丙酮定容，即得；

（3）制定色谱条件:

仪器：WATERS ACQUITY UPLC H-Class超高效液相色谱；

色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18规格为2.1mm×50mm,1.7u m的色谱柱；

流动相：乙腈与甲醇；

流动相流速：0.5ml/min；

检测波长：450nm；

进样体积：5ul；

柱温：27℃；

（4）进行常规系统适应性试验，注入超高效液相色谱仪进行叶黄素、β-胡萝卜素、β-隐黄质以及番茄红素含量测定。

2.根据权利要求1所述一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，其特征在于：流动相各组分的体积比为乙腈：甲醇=9:1。

3.根据权利要求1所述一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，其特征在于：步骤（1）对照品溶液的制备为：分别精密称取叶黄素、β-胡萝卜素、β-隐黄质、番茄红素对照品各1.0mg，加丙酮定容于5ml容量瓶中，得到浓度为200ug/ml单个对照品溶液；分别精密量取单个对照品溶液，置同一容量瓶，得到混合对照品溶液。

4.根据权利要求1所述一种草莓类胡萝卜素成分的含量测定方法，其特征在于：步骤（2）中加入的丙酮、石油醚以及10%KOH-甲醇中均含0.1%BHT。