[发明专利]农作物转基因成份检测法及所用芯片有效
| 申请号： | 201210526006.3 | 申请日： | 2012-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN102965442A | 公开（公告）日： | 2013-03-13 |
| 发明（设计）人： | 张明哲;张晓峰;陈笑梅;吴姗;陈曦 | 申请（专利权）人： | 浙江省检验检疫科学技术研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C40B40/06 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310016 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种农作物转基因成份检测法，包括以下步骤：一、制备转基因成份检测芯片；针对转基因农作物的内源、外源、品系这三类基因，选择特异性探针，每条特异性探针的5'进行氨基修饰；然后将氨基修饰后的探针固定醛基玻片上，预杂交后，得转基因成份检测芯片； 二、检测：1）、利用已知标准，获取转基因片段的引物；2）、农作物待测样品中DNA的提取，得提取液；3）、靶基因的多重PCR扩增；4）、芯片杂交检测：将扩增产物与转基因成份检测芯片杂交；然后进行荧光探针杂交，再利用T4DNA连接酶进行酶连接，接着用NaOH变性，最后用洗液洗涤； 5）、杂交结果的检测与分析：扫描所得的芯片，对结果进行分析。 | ||
| 搜索关键词： | 农作物 转基因 成份 检测 所用 芯片 | ||
【主权项】：
农作物转基因成份检测法，其特征是包括以下步骤：一、制备转基因成份检测芯片；针对转基因农作物的内源、外源、品系这三类基因，选择特异性探针，每条特异性探针的5'进行氨基修饰；然后将氨基修饰后的探针固定醛基玻片上，预杂交后，得转基因成份检测芯片；二、检测：依次进行以下步骤： 1）、利用已知标准，获取转基因片段的引物； 2）、农作物待测样品中DNA的提取，得提取液；3）、靶基因的多重PCR扩增：以步骤2）的提取液作为PCR模板，利用步骤1）所得的引物进行多重PCR扩增；得扩增产物；4）、芯片杂交检测：将扩增产物与转基因成份检测芯片杂交；然后进行荧光探针杂交，再利用T4DNA连接酶进行酶连接，接着用NaOH变性，最后用洗液洗涤； 所述荧光探针为与特异性探针相对应的荧光探针；5）、杂交结果的检测与分析：用扫描仪扫描上述步骤4）所得的芯片，利用常规软件对结果进行分析。
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