[发明专利]一种获得植物候选抗病基因序列的方法有效
申请号: | 201210511335.0 | 申请日: | 2012-12-04 |
公开(公告)号: | CN102965367A | 公开(公告)日: | 2013-03-13 |
发明(设计)人: | 王红梅;赵云雷;陈伟;李运海;龚海燕;桑晓慧 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人: | 刘黎明 |
地址: | 455000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及一种获得植物候选抗病基因序列的方法。该方法首先基于已知的植物抗病基因保守结构域序列设计抗性基因同源序列引物,然后以接种病原菌后及未接种对照的植物基因组DNA为材料,进行抗性基因同源序列引物锚定的甲基化敏感扩增多态性分析,得到受病原菌诱导的多态性条带,再对所得到的多态性条带进一步回收、扩增、克隆、测序,对测序得到的序列与已知的抗病反应基因进行同源性比对,与已知的抗病反应基因高度同源的序列即为候选抗病基因序列。该方法通用性高,选择目的性高,操作相对简便,可以高效提供丰富的植物候选抗病基因序列信息。 | ||
搜索关键词: | 一种 获得 植物 候选 抗病 基因 序列 方法 | ||
【主权项】:
一种获得植物候选抗病基因序列的方法,该方法包括:(1)根据已克隆的植物抗病基因保守结构域序列设计抗性基因同源序列引物;(2)提取接种病原菌后的植物植株基因组DNA,以未接种病原菌或接种清水的植物基因组DNA为对照,进行抗性基因同源序列引物锚定的甲基化敏感扩增多态性分析,得到受病菌诱导的多态性条带;(3)回收上述步骤(2)中所述受病原菌诱导的多态性条带,并进行PCR扩增、克隆、测序;(4)将测定的序列与已知的抗病反应基因进行同源性比对,与已知的抗病反应基因高度同源的序列即为候选抗病基因序列。
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