[发明专利]甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备

摘要

本发明公开了甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备，本发明采用的抗原为从甘蔗大田采集的成熟黑穗病病原菌孢子，经处理后在PDA培养基上培养获得，其步骤包括：（1）黑穗病病原菌孢子的采集处理，制备抗原；（2）取等量抗原（真菌孢子、菌丝体胞外多糖或上清液）分别与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂混合，乳化，颈背部皮下多点注射免疫新西兰白兔；（3）每两个星期免疫一次，共免疫四次，第八个星期后，颈动脉采血；（4）分离抗血清并纯化，获得目标多克隆抗体。本发明制备的多克隆抗体具有纯度高，特异性好，效价高，保存长久等优点，对甘蔗科研中通过免疫学方法检测甘蔗黑穗病具有重要意义，结合人工接种技术能提高甘蔗抗黑穗病育种效率。

主权项

一种甘蔗黑穗病病原菌多克隆抗体的制备，其特征在于：采集甘蔗大田的甘蔗黑穗病病原菌，制备抗原，将抗原在PDA培养基上培养获得到多克隆抗体，主要包括以下步骤：（1）抗原采集和制备：在甘蔗大田采集黑穗病病原菌，制备抗原（真菌孢子，菌丝体胞外多糖或上清液）备用；（2）抗原免疫培养：将获得的抗原与等量的福氏完全佐剂混合，乳化，在颈背部皮下多点注射，免疫新西兰白兔；第15天，取1 ml抗原加入等量福氏不完全佐剂，乳化，在颈背部皮下多点（8‑10点）注射，免疫新西兰白兔；每隔2周，按照所述的剂量和方法多次免疫白兔，在第八周测定效价达到要求后，颈动脉取血备用；（2）分离纯化：将步骤（2）获得的抗血清进行分离纯化，获得目标多克隆抗体。