[发明专利]一种目的蛋白制备方法及其用途无效
申请号: | 201210465278.7 | 申请日: | 2012-11-19 |
公开(公告)号: | CN103014048A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 任宏伟;凡复;陈星;陈胜亮 | 申请(专利权)人: | 厦门北大之路生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C07K14/575 |
代理公司: | 厦门市诚得知识产权代理事务所(普通合伙) 35209 | 代理人: | 赖开慧 |
地址: | 361000 福建省厦*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为,目的蛋白的核苷酸序列片段的获得;目的蛋白重组表达载体的构建;目的蛋白的诱导表达、纯化;切割;所述目的蛋白的核苷酸序列片段的下游引入单一切割位点;所述目的蛋白通过合成编码链和模板链,将两者杂交获得,在合成编码链和模板链时引入单体切割的识别位点;优选地,其中的目的蛋白可以是人神经生长因子,胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。采用本发明的制备方法制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化,基因表达产物即为目的蛋白单体,不带额外氨基酸残基,既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性,也省去了多拷贝的切割成本,纯化简单,易于大量生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 目的 蛋白 制备 方法 及其 用途 | ||
【主权项】:
一种目的蛋白的制备方法,其特征是:包括如下步骤,目的蛋白的核苷酸序列片段的获得;目的蛋白重组表达载体的构建;目的蛋白的诱导表达;目的蛋白的纯化;纯化产物的切割;所述目的蛋白的核苷酸序列片段的下游引入单一切割位点;所述目的蛋白通过合成编码链和模板链,将两者杂交获得,在合成编码链和模板链时引入单体切割的识别位点;优选地,所述目的蛋白是人神经生长因子,胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。
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