[发明专利]一种提高白及组培苗移栽成活率的方法

摘要

本发明公开了一种提高白及组培苗移栽成活率的方法，所用专用培养基由种子萌发培养基1/2MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.75mg/L+椰子汁20%+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L、增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L+KT3.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L、生根培养基MS+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂粉8g/L组成，按以下步骤进行：A.白及种子无菌萌发；B、增殖培养；C、生根培养和抗逆诱导；D、炼苗移栽。本发明在生根阶段加入SA0.3g/L+CTS2g/L的自制诱抗剂10ml/L，使其在生根培养的同时诱导组培苗的抗逆性，增强苗对外界环境的适应能力，以提高苗的移栽成活率。

主权项

一种提高白及组培苗移栽成活率的方法，其特征是：为组织培养方法，所用专用培养基由种子萌发培养基、增殖培养基和生根培养基组成，其中：种子萌发培养基的配方配比为： 1/2MS+6‑BA 1.0mg/L+NAA 0.75mg/L+椰子汁20%+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L；增殖培养基的配方配比为：MS+6‑BA 1.0mg/L + KT 3.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L；生根培养基的配方配比为：MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂粉8g/L；按以下步骤进行：A. 白及种子无菌萌发： 将采摘来的未开裂蒴果用自来水冲洗30min，然后用洗衣粉浸泡20min，再用自来水冲洗30min，然后在超净工作台上用75%酒精浸泡30秒，无菌水冲洗2‑3次，再置于次氯酸钠溶液中12分钟，期间不断搅拌，无菌水冲洗3‑5次，然后浸泡在无菌水中待用；用无菌的解剖刀将已消毒的白及蒴果切开，将白及种子接种在所述的种子萌发培养基中，培养于光照12小时/天，光照强度3000 1x，温度21士2oC的培养室；接种一星期后，种子萌发为肉眼可见的白色原球茎，两星期后白色原球茎膨大变绿；B、增殖培养：培养45天待种子苗长到2‑3cm左右，在超净工作台上，将种子苗取出，采用直立插入的方法转接到所述的增殖培养基中，培养于光照12小时/天，光照强度3000 1x，温度21士2oC的培养室；两个月后，增殖倍率达到5；C、生根培养和抗逆诱导：在超净工作台上，将白及无根苗取出，采用直立插入的方式接种到所述的生根培养基中，生根培养基中同时加有自制诱抗剂10ml/L，培养于光照12小时/天，光照强度3000 1x，温度21士2oC的培养室；两个月后，生根数可达2‑4条/株；所述自制诱抗剂的配方配比为：SA 0.3 g/L + CTS 2 g/L；D、炼苗移栽：从培养室取出培养瓶，置于炼苗室常温适应3d，旋松盖子2d，然后开盖适应3d；炼苗完成后，洗干净白及根部的琼脂，移栽到盛有松针土的花盆中；花盆周围摆上装满水的盆或敞口瓶以保持周围环境的湿度，移栽后精心管理，每天早晚叶面喷水；2周后可观察到叶片返青，继续培养35天后可见到新叶开始生长，表明移栽的苗已经成活。