[发明专利]一种提高白及组培苗移栽成活率的方法

说明书

技术领域

本发明属于组培育苗技术领域，具体说涉及一种提高白及组培苗移栽成活率的方法。 

  

背景技术：

白及（Bletilla striata（Thunb.）Rchb.f.）为兰科白及属多年生草本植物，以干燥假鳞茎入药，具有收敛止血，清热利湿，消肿生肌之功效，临床上广泛用于治疗咳血、吐血、外伤出血、疮疡肿毒、肺结核咳血、溃疡病出血等病症，在我国民间作为药用已有上千年的历史,为多种中成药的原料。另外工业上用作染布的粘合剂、在卷烟生产中用白及作粘合剂卷制烟条，在美容上用作护肤化妆品的原料，此外，白及花色艳丽，是一种很好的景观植物。近年来，由于白及的药用价值和观赏价值引起人们的关注，野生白及遭到过度采挖，导致野生资源越来越少，目前已被《中国植物红皮书一稀有濒危植物》第1册收录，同时也被写入了《濒危野生动植物国际贸易公约》保护种类。白及的种子非常细小且无胚乳，自然条件下极难萌发和生长，实生苗的栽培较为困难，传统栽培主要靠分株繁殖，但分株繁殖周期长，繁殖效率低，而且耗种量大，很难满足大量栽培的需要。组织培养技术可以快速繁殖大量种苗，远较分株繁殖快捷高效。近年来，一些地区开展了白及组培快繁的研究，但实验证明白及组培苗移栽成活率非常低，未能使组培快繁技术应用于生产实践。

  

发明内容：

本发明的目的在于提供一种提高白及组培苗移栽成活率的方法，该方法在生根阶段加入自制诱抗剂，使其在生根培养的同时诱导组培苗的抗逆性，增强苗对外界环境的适应能力，以提高苗的移栽成活率。

  

本发明的技术方案是：一种提高白及组培苗移栽成活率的方法，为组织培养方法，所用专用培养基由种子萌发培养基、增殖培养基、生根培养基组成，其中：

种子萌发培养基的配方配比为：1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.75mg/L+椰子汁20%+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L；

增殖培养基的配方配比为：MS+6-BA 1.0mg/L + KT 3.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉8g/L；

生根培养基的配方配比为：MS+NAA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂粉8g/L；

一种提高白及组培苗移栽成活率的方法，按以下步骤进行：

A. 白及种子无菌萌发：将采摘来的未开裂蒴果用自来水冲洗30min，然后用洗衣粉浸泡20min，再用自来水冲洗30min，然后在超净工作台上用75%酒精浸泡30秒，无菌水冲洗2-3次，再置于次氯酸钠溶液中12分钟，期间不断搅拌，无菌水冲洗3-5次，然后浸泡在无菌水中待用；用无菌的解剖刀将已消毒的白及蒴果切开，将白及种子接种在上述的种子萌发培养基中，培养于光照12小时/天，光照强度3000 1x，温度21士2^oC的培养室；接种一星期后，种子萌发为肉眼可见的白色原球茎，两星期后白色原球茎膨大变绿，萌发率可达到99%以上；

B、增殖培养：培养45天待种子苗长到2-3cm左右，在超净工作台上，将种子苗取出，采用直立插入的方法转接到上述的增殖培养基中，培养于光照12小时/天，光照强度3000 1x，温度21士2^oC的培养室。两个月后，增殖倍率达到5；

C、生根培养和抗逆诱导：在超净工作台上，将白及无根苗取出，采用直立插入的方式接种到上述的生根培养基中，生根培养基中同时加有自制诱抗剂10ml/L，培养于光照12小时/天，光照强度为30001x，温度为21士2^oC的培养室；两个月后，平均每株生根数可达到2-4条；所述自制诱抗剂的配方配比为：SA 0.3 g/L + CTS 2 g/L；

D、炼苗移栽：从培养室取出培养瓶，置于炼苗室常温适应3d，旋松盖子2d，然后开盖适应3d；炼苗完成后，洗干净白及根部的琼脂，移栽到盛有松针土的花盆中；花盆周围摆上装满水的盆或敞口瓶以保持周围环境的湿度，移栽后精心管理，每天早晚叶面喷水；2周后可观察到叶片返青，继续培养35天后可见到新叶开始生长，表明移栽的苗已经成活。