[发明专利]一种GBSS1比酶活测定方法无效
申请号: | 201210445572.1 | 申请日: | 2012-11-08 |
公开(公告)号: | CN103808929A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 蔡秀玲;刘德瑞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200031 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种GBSS1比酶活测定方法。提供了一种颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS1酶)比酶活测定的方法,应用ELISA技术对酶提取物在GBSS1蛋白水平上进行了定量,并对以往的GBSS1酶活测定步骤进行了简化。 | ||
搜索关键词: | 一种 gbss1 测定 方法 | ||
【主权项】:
1.一种测定作物种子中颗粒结合型淀粉合成酶的比酶活的方法,其特征在于,所述方法包括:(1)从作物种子中提取颗粒结合型淀粉合成酶,获得酶提取液,作为待测样品;采用酶联免疫吸附测定获得待测样品中颗粒结合型淀粉合成酶的蛋白量;(2)将待测样品与支链淀粉、底物ADPG进行如(I)反应并记录颗粒结合型淀粉合成酶反应时间:
之后加入磷酸烯醇式丙酮酸、丙酮酸激酶,进行如(II)反应:
(3)测定反应(II)中生成的产物ATP的量,除以步骤(1)获得的颗粒结合型淀粉合成酶的蛋白量以及步骤(2)记录的颗粒结合型淀粉合成酶反应时间,获得颗粒结合型淀粉合成酶的比酶活。
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