[发明专利]一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法无效
| 申请号： | 201210276843.5 | 申请日： | 2012-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN102851308A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 张耀洲;张小蓓;杨波;陈剑清;舒特俊 | 申请（专利权）人： | 天津耀宇生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12R1/94 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 张艳赞 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区开发区洞*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法。本发明通过设计引物，构建重组表达载体pET-32a(+)-p10，诱导表达得到大量重组目的蛋白，然后将蛋白放于4℃，使其产生自然沉降，离心后将沉淀洗涤并溶解从而得到大量较纯的重组目的蛋白。本发明克服了现有纯化方法中的很多繁琐的步骤，利用沉淀、溶解、差速离心的方法去掉大部分杂蛋白，减少了对目的蛋白的损伤及损耗，能够利用简单的步骤得到大量较纯的目的蛋白，既简单又节省了大量的人力、物力、财力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 家蚕 核型 多角体 病毒 p10 蛋白 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种家蚕核型多角体病毒P10蛋白的表达纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)以家蚕多角体病毒基因组为模板进行p10基因的扩增；(b)分别双酶切p10基因和载体，连接构建重组表达载体，转化表达菌，构建p10基因工程菌；(c)培养p10基因工程菌，诱导表达重组目的蛋白；(d)纯化所得重组目的蛋白。
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