[发明专利]建立幽门螺杆菌核酸指纹图谱的方法及其产品有效
申请号: | 201210272533.6 | 申请日: | 2012-08-02 |
公开(公告)号: | CN102827930A | 公开(公告)日: | 2012-12-19 |
发明(设计)人: | 马庆伟;赵洪斌;张海燕;赵艳梅 | 申请(专利权)人: | 向华 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410128 湖南省长沙市芙*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于质谱技术快速鉴定幽门螺杆菌的方法,包括PCR扩增、SAP酶消化、转录和核酸酶切、纯化、质谱仪检测等步骤。基于该方法,建立螺旋幽门杆菌的核酸指纹图谱数据库。根据实验产生的质谱峰图,可对待检样品中的幽门螺杆菌进行快速鉴定,结果可广泛运用于幽门螺杆菌分型和分类、及环境卫生和公共安全检疫等领域。 | ||
搜索关键词: | 建立 幽门 螺杆 菌核 指纹 图谱 方法 及其 产品 | ||
【主权项】:
建立幽门螺杆菌核酸指纹图谱的方法及其产品,其特征在于,它至少包括如下步骤:(1)PCR反应:使用针对幽门螺杆菌的PCR通用引物,进行PCR扩增,得到含扩增目标区域的PCR产物;(2)SAP酶消化:用碱性磷酸酶(SAP酶)处理步骤(1)得到的PCR产物;(3)转录和核酸酶切:使用特定的转录和内切酶,分别在一个反应体系中,对步骤(2)得到的各个消化产物进行转录和核酸酶切,获得一系列长度不一、丰度不一的核酸片段;(4)纯化:使用树脂处理步骤(3)得到的酶切产物;(5)质谱仪检测:将步骤(4)得到的纯化产物上点在含有基质的靶片上,上质谱仪进行检测,得到不同细菌的特征核酸指纹谱图。
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