[发明专利]能抑制口蹄疫病毒的shRNA转基因重组质粒及其应用

摘要

本发明属于遗传工程技术领域，具体为一种能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒及其应用。该质粒含有两个shRNA表达基因，能同时编码两种分别靶向口蹄疫病毒基因组3DRNA聚合酶和2B非结构蛋白保守区域的特异shRNA；两个shRNA表达基因呈串联状态。该质粒适用于多种转基因技术。当使用PB转座子系统将该质粒转入体外培养的猪细胞IBRS-2后，经攻毒实验证明，筛选得到的转基因细胞系具有抵抗20-50TCID50剂量O型或亚洲Ⅰ型FMDV毒株感染的能力。当将该质粒通过显微注射导入小鼠受精卵后，筛选得到的转基因小鼠家系使用3-6LD50O型FMDV毒株感染时，相对同窝小鼠对照明显提高了存活率。

主权项

一种能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒，其特征在于，该质粒含有两个shRNA表达基因，能同时编码两种分别靶向口蹄疫病毒基因组3D RNA聚合酶和2B非结构蛋白保守区域的特异shRNA；其中，所述两个shRNA表达基因中一个能表达抗口蹄疫病毒的shRNA，该shRNA靶向口蹄疫病毒基因组中3D基因；所述两个shRNA表达基因中一个能表达抗口蹄疫病毒的shRNA，该shRNA靶向口蹄疫病毒基因组中2B基因；两个shRNA表达基因呈串联状态。