[发明专利]能抑制口蹄疫病毒的shRNA转基因重组质粒及其应用有效
申请号: | 201210223353.9 | 申请日: | 2012-07-02 |
公开(公告)号: | CN102703504A | 公开(公告)日: | 2012-10-03 |
发明(设计)人: | 刘明秋;郑兆鑫;曾溢滔;焦晔;严维耀 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抑制 口蹄疫病毒 shrna 转基因 重组 质粒 及其 应用 | ||
1.一种能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒,其特征在于,该质粒含有两个shRNA表达基因,能同时编码两种分别靶向口蹄疫病毒基因组3D RNA聚合酶和2B非结构蛋白保守区域的特异shRNA;其中,所述两个shRNA表达基因中一个能表达抗口蹄疫病毒的shRNA,该shRNA靶向口蹄疫病毒基因组中3D基因;所述两个shRNA表达基因中一个能表达抗口蹄疫病毒的shRNA,该shRNA靶向口蹄疫病毒基因组中2B基因;两个shRNA表达基因呈串联状态。
2.根据权利要求1所述的能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒,其特征在于,在所述两个shRNA表达基因之间插入有报告基因。
3.根据权利要求2所述的能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒,其特征在于,所述报告基因为EGFP与新霉素抗性(Neo-R),这两个报告基因外端分别克隆了一个loxP位点。
4.根据权利要求1所述的能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒,其特征在于,所选择的保守区基因3D和2B来自任何一型的口蹄疫病毒,包括O型、A型、亚洲I型。
5.如权利要求1或2所述的重组质粒在转基因育种中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于将权利要求1或2所述的重组质粒转入哺乳动物细胞系,使该转基因细胞系抵抗FMDV感染。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于将如权利要求1或2所述的重组质粒转入小鼠或猪、牛、羊偶蹄类哺乳动物,使转基因动物后代抵抗FMDV感染,提高抗病能力。
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