[发明专利]检测菌体活细胞的方法及其应用以及引物与试剂盒有效
| 申请号： | 201210199850.X | 申请日： | 2012-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN103509850A | 公开（公告）日： | 2014-01-15 |
| 发明（设计）人： | 赵亮;任发政;乔雪微 | 申请（专利权）人： | 任发政 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/06;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 王崇;周建秋 |
| 地址： | 100083 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测待测样品中的菌体的活细胞的方法及其在检测肠道内容物的菌体活细胞数中的应用，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）将所述待测样品与PMA接触；对接触后的产物进行提取DNA的操作，得到DNA样品；（2）对所述DNA样品进行PCR扩增的操作，获得扩增产品；（3）根据所述扩增产品中菌体DNA的扩增产物的量判断待测样品中菌体活细胞的数量。本发明还提供一种引物和一种检测待测样品中的菌体的试剂盒。通过上述技术方案，实现了菌体活细胞的定性定量检测，且本发明的检测方法特异性强，检测结果的误差小。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 菌体 细胞 方法 及其 应用 以及 引物 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种检测待测样品中的菌体的活细胞的方法，所述待测样品为含有或不含有上述菌体的活细胞的悬浊液，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）将所述待测样品与叠氮溴化丙锭接触，相对于每ml的所述待测样品，叠氮溴化丙锭的用量为65‑75μg，优选为68‑72μg，所述接触包括依次进行暗处理和光处理；对接触后的产物进行提取DNA的操作，得到DNA样品；（2）在能特异性地使所述菌体的DNA得到扩增的条件下，对所述DNA样品进行PCR扩增的操作，获得扩增产品；（3）根据所述扩增产品中菌体DNA的扩增产物的量判断待测样品中菌体活细胞的数量，其中，所述菌体DNA的扩增产物的量越多，则指示待测样品中菌体活细胞的数量越多。
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