[发明专利]一种检测MGMT活性的化学发光检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明提供了一种检测O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）活性的化学发光检测试剂盒，它包含有：链霉亲和素磁珠，生物素化的O6-苄基鸟嘌呤，O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶特异性抗体anti-MGMT的酶标记物，O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶标准品溶液，发光底物液，浓缩洗涤液。本发明还公开了一种应用上述试剂盒用于MGMT的检测方法，它包括步骤：首先进行样品总蛋白质提取，然后采用试剂盒检测，最后分析检测结果。本发明提供了一种检测人组织或细胞中的MGMT活性的化学发光检测试剂盒及检测方法，具有操作简便、快速，检测结果灵敏度高、特异性强等诸多优点，在MGMT活性临床检测方面具有广阔的应用前景。

主权项

一种检测O6‑甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶活性的化学发光检测试剂盒，主要包括：试剂1：链霉亲和素磁珠浓度为1~5mg/mL的分散液，溶剂为含有0.5%牛血清白蛋白、1%酪蛋白的pH 7.2、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液；试剂2：生物素标记的O6‑苄基鸟嘌呤溶液，使用时以含有叠氮钠0.2g/L、BSA1.0g/L的pH 7.2、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液稀释至浓度为5μg/mL；试剂3：辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的抗人MGMT特异性单克隆抗体，使用时以含有0.05%甘油和0.2g/L的硫柳汞的防腐剂溶液稀释至浓度为2μg/mL；试剂4：O6‑甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶标准品溶液，溶剂为含有0.5%牛血清白蛋白、1%酪蛋白的pH 7.2、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液；试剂5：发光底物液，为过氧化氢‑鲁米诺发光液或者AMPPD溶液；试剂6：浓缩洗涤液，为含有0.1%~0.5%吐温‑20、0.1%叠氮化钠的磷酸盐缓冲溶液，pH 7.4，使用时蒸馏水稀释20倍。