[发明专利]检测花色苷在靶细胞生物利用度的方法有效
| 申请号： | 201210165840.4 | 申请日： | 2012-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN102721675A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 易龙;糜漫天;陈明亮;金鑫 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了检测花色苷在靶细胞生物利用度的方法，具体为，用终浓度为1～200μM的花色苷处理靶细胞，得处理靶细胞；将所得处理靶细胞先用PBS洗涤，再用胰蛋白酶消化，然后破碎细胞，最后离心收集上清液；将所得上清液用氮气干燥，干燥后溶于pH=3～3.5的甲醇溶液中，测定在最大接收波长的荧光强度；准确称取花色苷，溶于pH=3～3.5的甲醇溶液中，配置成浓度梯度的标准液，然后测定标准液在最大接收波长的荧光强度，根据标准液浓度和荧光强度绘制标准曲线；然后根据标准曲线计算靶细胞的花色苷浓度，最后计算花色苷在靶细胞的生物利用度；利用本发明公开的方法可以用于检测花色苷在靶细胞中的生物利用度，具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 花色 靶细胞 生物 利用 方法 | ||
【主权项】：
检测花色苷在靶细胞生物利用度的方法，其特征在于，包括以下步骤：a.用终浓度为1～200μM的花色苷处理靶细胞，得处理靶细胞；b.将步骤a所得处理靶细胞先用PBS洗涤，再用胰蛋白酶消化，计数细胞，然后破碎细胞，最后离心收集上清液，备用；c.将步骤b所得上清液用氮气干燥，干燥后溶于pH=3～3.5的甲醇溶液中，测定在最大接收波长的荧光强度；d.准确称取花色苷，溶于pH=3～3.5的甲醇溶液中，配置成浓度梯度的标准液，然后测定标准液在最大接收波长的荧光强度，根据标准液浓度和荧光强度绘制标准曲线；然后根据标准曲线计算步骤c所得荧光强度的花色苷浓度，用生物利用度=花色苷浓度×样品体积计算花色苷在靶细胞的生物利用度。
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