[发明专利]构建核酸库的方法、试剂及试剂盒无效
| 申请号： | 201210157798.1 | 申请日： | 2012-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN102703426A | 公开（公告）日： | 2012-10-03 |
| 发明（设计）人： | 王焱 | 申请（专利权）人： | 吴江汇杰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215211 江苏省吴江市汾湖经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明为建立具有标签的核酸库提供了方法、试剂及试剂盒，并采用了体外转座的方法。首先用转座酶随机打断目标DNA，然后用核酸酶和DNA聚合酶处理，产生有标记的DNA文库。本发明允许连接任何所需标记的DNA片段，使所产生标记的DNA片段，可以直接应用到不同的第二代测序平台，包括但不限于由Illumina，Life Technologies(ABI)，Roche，HelicosBiotechnologies，Pacific Biosciences这些公司制造的仪器，同样也适用于其它厂商生产的测序仪。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 核酸 方法 试剂 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种随机断裂并同时标记DNA片段的方法，其特征在于，包括以下步骤：i.转座酶、双链转座子及目标DNA混合后发生反应，就是在转座酶的催化作用下，双链的转座子末端序列随机插入目标DNA序列中，形成被转座子末端序列标记的DNA片段，这些片段从5’至3’，始于双链转座子末端序列，继而是9个碱基对的单链DNA序列，然后是双链目标DNA片段，9个碱基对的单链DNA序列和双链转座子末端；ii.去除标记在DNA两端的双链转座子末端序列，生成未标记的DNA片段。iii.在未标记的DNA片断上连接需要的DNA标签，产生一个有新的标签的DNA片段。
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