[发明专利]SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法及其应用无效
| 申请号： | 201210155164.2 | 申请日： | 2012-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN102660580A | 公开（公告）日： | 2012-09-12 |
| 发明（设计）人： | 李陶;甘靖毅;姜新根;孟繁伟;李婵;刘宗才;丁长才;姜舒;胡祥 | 申请（专利权）人： | 深圳市北科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N5/10;A61K48/00;A61K38/44;A61P39/06 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所 44248 | 代理人： | 胡吉科;邓扬 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，包括如下步骤：A）将SOD3基因连接到腺病毒载体上，得到重组腺病毒载体；B）利用转染试剂将重组腺病毒载体与包装质粒共转染到293细胞系中，培养至293细胞系完全出现病变效应，收集得到腺病毒毒株，保存毒株并确认SOD3基因已连接到腺病毒载体上；C）将腺病毒毒株扩增，感染293细胞系，收集腺病毒上清液，超滤纯化浓缩后测定滴度；D）腺病毒病毒液分别以不同条件感染间充质干细胞，确定最佳的感染条件，得到SOD基因修饰间充质干细胞。本发明方法可得到EC-SOD基因过表达的SOD基因修饰间充质干细胞，将其应用于辐射小鼠的治疗，可延长辐射小鼠的存活期。 | ||
| 搜索关键词： | sod 基因 修饰 间充质 干细胞 构建 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：A）将SOD3基因连接到腺病毒载体上，得到重组腺病毒载体；B）培养293细胞系，利用Lipofectamine转染试剂将腺病毒重组载体与包装质粒共转染到293细胞系中，常规培养10～12 天，至293细胞系完全出现病变效应，收集得到腺病毒毒株，保存毒株并确认SOD3基因已成功连接到腺病毒载体上；C）将腺病毒毒株进行大量扩增，感染293细胞系，经观察细胞出毒后收集腺病毒上清液，对其进行超滤纯化浓缩，测定上清液中腺病毒的滴度；D）腺病毒上清液分别以不同条件感染间充质干细胞，确定感染的最佳条件，得到SOD基因修饰间充质干细胞。
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