[发明专利]SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，其特征在于：包括如下步骤：

A）将SOD3基因连接到腺病毒载体上，得到重组腺病毒载体；

B）培养293细胞系，利用Lipofectamine转染试剂将腺病毒重组载体与包装质粒共转染到293细胞系中，常规培养10～12 天，至293细胞系完全出现病变效应，收集得到腺病毒毒株，保存毒株并确认SOD3基因已成功连接到腺病毒载体上；

C）将腺病毒毒株进行大量扩增，感染293细胞系，经观察细胞出毒后收集腺病毒上清液，对其进行超滤纯化浓缩，测定上清液中腺病毒的滴度；

D）腺病毒上清液分别以不同条件感染间充质干细胞，确定感染的最佳条件，得到SOD基因修饰间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，其特征在于：所述腺病毒载体采用穿梭质粒pDC315。

3.根据权利要求2所述的SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，其特征在于：所述包装质粒采用pBHGloxΔE1和3Cre质粒载体。

4.根据权利要求3所述的SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法，其特征在于：所述感染的最佳条件为50MOI病毒液结合5μM HP4短肽。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的SOD基因修饰间充质干细胞的构建方法构建的SOD基因修饰间充质干细胞在制备治疗急性辐射综合症的药物中的应用。