[发明专利]一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法

摘要

本发明一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法，属于生物技术领域。其具体步骤包括：首先实验药品的配制及柳枝稷叶片或茎取材；其次是用化学试剂将生物样品中的核酸释放出来；第三是氯仿抽提游离RNA，异丙醇沉淀得到总RNA；第四是总RNA的鉴定，分别用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测。根据电泳及数据结果，表明所得植物组织RNA完整性好、纯度高并且产率高，可以满足分子生物学研究应用。同时本发明实验过程简便，操作方便、安全，结果准确、有效，重复性好。

主权项

一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）样品研磨：取约0.5~1g新鲜的柳枝稷叶片或茎材料于研钵中，加入3mm碳化钨研磨珠3~5个，加入液氮后迅速研磨，重复数次直至磨成粉末，研磨时间控制在1min，将研磨后的粉末加入预冷的1.5mL EP管中；（2）核酸释放：向步骤（1）中的离心管中加入1mL 配制好的RNA提取液，充分振荡，使其混合均匀，平行放置8‑10min；微升（3）氯仿抽提：12000~14000r/min离心5~8min，取上清液600~800微升转入新的1.5mL EP管中，加入预冷的250~300微升氯仿，在涡旋器上涡旋15s，使其充分混匀；（4）异丙醇沉淀：12000~14000r/min离心8~10min，取上层水相200~300微升转入新的1.5mL EP管中，加入200~300微升异丙醇，上下颠倒数次；（5）清洗：12000~14000r/min离心5~8min，倒掉上清液，加入体积分数为70‑80%乙醇洗涤沉淀；（6）取沉淀物于超净台吹干约8‑10min，加入体积分数为0.1‰~0.1%的焦碳酸二乙酯溶解，得总RNA。