[发明专利]一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法

权利要求书

1.一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）样品研磨：取约0.5~1g新鲜的柳枝稷叶片或茎材料于研钵中，加入3mm碳化钨研磨珠3~5个，加入液氮后迅速研磨，重复数次直至磨成粉末，研磨时间控制在1min，将研磨后的粉末加入预冷的1.5mL EP管中；

（2）核酸释放：向步骤（1）中的离心管中加入1mL 配制好的RNA提取液，充分振荡，使其混合均匀，平行放置8-10min；微升

（3）氯仿抽提：12000~14000r/min离心5~8min，取上清液600~800微升

转入新的1.5mL EP管中，加入预冷的250~300微升氯仿，在涡旋器上涡旋15s，使其充分混匀；

（4）异丙醇沉淀：12000~14000r/min离心8~10min，取上层水相200~300微升转入新的1.5mL EP管中，加入200~300微升异丙醇，上下颠倒数次；

（5）清洗：12000~14000r/min离心5~8min，倒掉上清液，加入体积分数为70-80%乙醇洗涤沉淀；

（6）取沉淀物于超净台吹干约8-10min，加入体积分数为0.1‰~0.1%的焦碳酸二乙酯溶解，得总RNA。

2.根据权利要求1所述的一种简单、快速提取柳枝稷组织总RNA的方法，其特征在于其中步骤（2）中所述的RNA提取液每100ml含有20~30ml的水饱和酚，4~5ml的甘油，0.1~0.2mol的异硫氰酸胍，0.01~0.02mol的pH=4.0的NaAc缓冲液，1~1.5ml的十二烷基肌氨酸钠。