[发明专利]亚克隆细胞株TF-1-A2及其制备方法与用途有效
| 申请号： | 201210119401.X | 申请日： | 2012-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN102660505A | 公开（公告）日： | 2012-09-12 |
| 发明（设计）人： | 刘荷中;乐伟;霍立红;史权威;李曼 | 申请（专利权）人： | 北京华安科创生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人： | 胡敬红 |
| 地址： | 100085 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及“亚克隆细胞株TF-1-A2及其制备方法与用途”，属于生物技术领域。TF-1-A2亚克隆稳定细胞株的制备方法，包括：将GM-CSF依赖的TF-1细胞驯化为NGF依赖株；对诱导后的NGF依赖的TF-1细胞进行甲基纤维素半固体培养基克隆化；从半固体培养基中挑取单克隆细胞扩大培养；制备各单克隆细胞株对NGF的剂量-效应曲线，筛选获得亚克隆细胞株TF-1-A2。本发明得到的TF-1-A2亚克隆细胞株对NGF高度敏感且有良好的反应性，连续传代稳定性好。利用TF-1-A2亚克隆细胞株建立的TF-1细胞增值法，用于体外定量测定神经生长因子的生物学活性，信噪比高，重复性好，优于现有方法。 | ||
| 搜索关键词： | 克隆 细胞株 tf a2 及其 制备 方法 用途 | ||
【主权项】：
一种筛选亚克隆细胞株TF‑1‑A2的方法，包括如下步骤：4)利用NGF对rhGM‑CSF依赖的TF‑1细胞株进行驯化，使其转变为依赖NGF维持正常生长TF‑1细胞株，5)对NGF依赖的TF‑1细胞株进行克隆化，挑选单克隆细胞扩大培养，6)绘制各单克隆细胞株对NGF的剂量‑效应曲线，根据Emax值和信噪比S/N值对得到的单克隆细胞株进行筛选，获得TF‑1‑A2亚克隆细胞株。
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