[发明专利]一种番茄遗传转化的方法有效
申请号: | 201210112183.7 | 申请日: | 2012-04-17 |
公开(公告)号: | CN103074364A | 公开(公告)日: | 2013-05-01 |
发明(设计)人: | 徐洪伟;周晓馥;吕杰 | 申请(专利权)人: | 吉林师范大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 吉林省长春市新时代专利商标代理有限公司 22204 | 代理人: | 石岱 |
地址: | 136000 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明涉及一种番茄遗传转化的方法,属于遗传工程技术领域,具体的说公开了一种番茄种子整体侵染的方法,该方法包括测成熟番茄种子的生理吸胀曲线;含有目标基因的发根农杆菌培养;结合番茄种子的生理吸胀曲线,将消毒灭菌的番茄种子转入到OD600值为0.8-1.3的发根农杆菌菌液中振荡侵染7-9小时;在25℃黑暗条件下共培养3天;抗性植株的筛选;抗性植株的生根及培育;转化植株炼苗及移栽等步骤。本发明由于采用在番茄种子吸胀阶段用发根农杆菌菌液侵染,大大提高了转化效率,经过压力筛选培养基进行筛选,缩短了实验周期2-3个月,简化了实验过程,减少了转化后的鉴定工作量。对番茄基因工程的理论研究及遗传育种实践均具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 番茄 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种番茄遗传转化的方法,该方法是采用番茄种子整体侵染的方法实现的,步骤包括:① 测成熟番茄种子的生理吸胀曲线,② 含有目标基因的发根农杆菌培养,③ 番茄种子的消毒灭菌,④ 结合番茄种子的生理吸胀曲线,将经消毒灭菌的成熟番茄种子转入到OD600值为0.8‑1.3的发根农杆菌菌液中振荡侵染7‑9小时,⑤ 在25℃黑暗条件下共培养3天,⑥ 抗性植株的筛选,⑦ 抗性植株的生根及培育,⑧ 转化植株炼苗及移栽。
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