[发明专利]一种检测Tgf2转座子在金鱼基因组插入侧翼序列和拷贝数的方法无效
| 申请号： | 201210105195.7 | 申请日： | 2012-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN102628083A | 公开（公告）日： | 2012-08-08 |
| 发明（设计）人： | 邹曙明;田玉梅;蒋霞云 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 金重庆 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测Tgf2转座子在金鱼基因组插入侧翼序列和拷贝数的方法：通过对带有Tgf2转座子的金鱼基因组DNA提取；再对全基因组DNA进行限制性内切酶酶切；酶切好的DNA片段与splinkerette接头连接；接下来分别进行第一轮PCR和第二轮PCR分别扩增转座子插入位点5'和3'侧翼序列，对第二轮PCR产物进行克隆和序列测定，从而检测出Tgf2转座子在鱼类基因组侧翼序列，并推测插入的拷贝数。本发明优点在于：具有简便、高效和低成本特点，可为利用Tgf2转座子介导的其他鱼类基因组插入诱变和转基因后代的拷贝数和侧翼序列的检测提供快速、准确的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 tgf2 座子 金鱼 基因组 插入 侧翼 序列 拷贝 方法 | ||
【主权项】：
一种检测Tgf2转座子在金鱼基因组插入侧翼序列和拷贝数的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：（1）通过对带有Tgf2转座子的金鱼基因组DNA提取；（2）再对全基因组DNA进行限制性内切酶酶切；（3）酶切好的DNA片段与splinkerette接头连接；（4）接下来分别进行第一轮 PCR和第二轮 PCR分别扩增转座子插入位点5'和3'侧翼序列，对第二轮PCR产物进行克隆和序列测定，从而检测出Tgf2转座子在鱼类基因组侧翼序列，并推测插入的拷贝数，所述的检测出的Tgf2转座子在鱼类基因组侧翼序列数即为插入的拷贝数。
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