[发明专利]纳米吸附富集大体积水生动物生活水体中水病毒的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种纳米吸附富集大体积水生动物生活水体中水病毒的方法及试剂盒。所述方法包括以下步骤：（1）将纳米富集材料加入到20L~30L水生动物生活水体中富集水病毒；（2）对步骤（1）的水生动物生活水体进行粗过滤，得到沉淀物；（3）将沉淀物放入病毒释放缓冲液中，混匀后静置，得到上清液；（4）将上清液与纳米磁珠混匀，静置，使病毒吸附在纳米磁珠上；（5）加入磁铁，混匀后静置，将纳米磁珠吸在磁铁上；（6）取出磁铁，将磁铁放入病毒活性保存液中。本发明可以有效富集水体中的水病毒，并能预扩增和保持富集的水病毒的活性，适用于渔场和野外水域中水生动物生活水体中水病毒的监测和检测采样。

主权项

一种纳米吸附富集大体积水生动物生活水体中水病毒的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）将纳米富集材料加入到20L～30L水生动物生活水体中富集水病毒； （2）对步骤（1）的水生动物生活水体进行粗过滤，得到沉淀物；（3）将沉淀物放入病毒释放缓冲液中，混匀后静置，得到上清液；（4）将上清液与纳米磁珠混匀，静置，使病毒吸附在纳米磁珠上；（5）加入磁铁，混匀后静置，使纳米磁珠吸在磁铁上；（6）取出磁铁，将磁铁放入病毒活性保存液中； 其中，所述纳米富集材料为用于富集水生动物淡水生活水体中水病毒的纳米富集材料Ⅰ，该纳米富集材料Ⅰ是由滑石粉、硅藻土和固体安全酸按照质量比为10:3:1混合制成；或用于富集水生动物海水生活水体中水病毒的纳米富集材料Ⅱ，该纳米富集材料Ⅱ是由滑石粉、硅藻土和固体安全酸按照质量比为10:3:2混合制成；所述纳米磁珠为粒径10‑12nm的Fe3O4纳米磁珠； 所述病毒活性保存液为含2%小牛血清的细胞培养液，并且在细胞培养液中添加了鱼类细胞、100U/ML青霉素、0.1mg/ML链霉素和25U/ML制霉菌素，所述细胞培养液的pH为7.5～8.5。