[发明专利]基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法

摘要

本发明公开了一种基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，其包括以下步骤：1)制备试样；2)制备2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基；3)制备接种菌悬液；4)检测操作；5)评价与报告。本发明的检测方法操作简单，结果准确，重复性好，具有较高应用价值。

主权项

基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)制备试样将样品剪成正方形，正反两面均在紫外下照射30min灭菌；步骤2)制备2，3，5‑氯化三苯基四氮唑固体培养基用常规培养基配制方法配制固体培养基，按2/100000加入2，3，5‑氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121℃，灭菌20min；步骤3)制备接种菌悬液取培养好的菌悬液各0.5ml加入4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10‑1的浓度，充分混匀后取10‑1浓度的菌悬液0.5ml加入另一只4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10‑2的浓度，依次类推，直至稀释至10‑4的浓度的接种菌悬液；步骤4)检测操作4.1)向已灭好菌的平皿中倒入2，3，5‑氯化三苯基四氮唑固体培养基15～25ml，室温凝固；4.2)取制备好的接种菌悬液0.1ml加到2，3，5‑氯化三苯基四氮唑固体培养基表面，用无菌涂布棒涂布均匀，室温静5～10min；4.3)将试样平贴在培养基上，功能面朝下，用镊子轻压试样，使其紧贴于培养基表面；各样品边缘相距1.5cm以上，与平皿边缘也相距1.0cm以上；每样均做4～6个平行；4.4)倒置平皿，于生化培养箱中培养，其中，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌37℃±1℃培养18～24h；白色念珠菌28±1℃培养24～48h；4.5)于体式显微镜或显微镜下观察菌落生长情况；步骤5)评价与报告试样抑菌率按下式(1)计算： Y = Xa - Xb Xa × 100 % - - - ( 1 ) 式中：Y为抑菌率，100％；Xa为未经抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu；Xb为抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu。