[发明专利]基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法

权利要求书

1.基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)制备试样

将样品剪成正方形，正反两面均在紫外下照射30min灭菌；

步骤2)制备2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基

用常规培养基配制方法配制固体培养基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121℃，灭菌20min；

步骤3)制备接种菌悬液

取培养好的菌悬液各0.5ml加入4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10^-1的浓度，充分混匀后取10^-1浓度的菌悬液0.5ml加入另一只4.5ml灭菌的生理盐水试管中，即稀释至10^-2的浓度，依次类推，直至稀释至10^-4的浓度的接种菌悬液；

步骤4)检测操作

4.1)向已灭好菌的平皿中倒入2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基15～25ml，室温凝固；

4.2)取制备好的接种菌悬液0.1ml加到2，3，5-氯化三苯基四氮唑固体培养基表面，用无菌涂布棒涂布均匀，室温静5～10min；

4.3)将试样平贴在培养基上，功能面朝下，用镊子轻压试样，使其紧贴于培养基表面；各样品边缘相距1.5cm以上，与平皿边缘也相距1.0cm以上；每样均做4～6个平行；

4.4)倒置平皿，于生化培养箱中培养，其中，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌37℃±1℃培养18～24h；白色念珠菌28±1℃培养24～48h；

4.5)于体式显微镜或显微镜下观察菌落生长情况；

步骤5)评价与报告

试样抑菌率按下式(1)计算：

Y=Xa-XbXa×100%---(1)]]>

式中：Y为抑菌率，100％；Xa为未经抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu；Xb为抗菌处理试样菌落数平均值，单位为cfu。

2.根据权利要求1所述的基于平板培养基的皮革材料的抑菌效果检测方法，其特征在于，所述菌悬液的制备方法如下：从保存于4℃冰箱的菌种斜面中取一接种环菌，在平板培养基上划线，37℃±1℃，培养18～24h；取液体培养基20ml放入100ml三角瓶中；用接种环从已培养18～24h的平皿中挑取一个典型的菌落，接种到液体培养基中，37℃±1℃，130r/m振荡培养18～20h，即为菌悬液。